不同接骨方药对骨髓间充质干细胞增殖、成骨分化、迁移影响的实验研究-中医骨伤科学专业论文 word格式.docxVIP

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2018-04-24 发布于上海
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不同接骨方药对骨髓间充质干细胞增殖、成骨分化、迁移影响的实验研究-中医骨伤科学专业论文 word格式.docx

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不同接骨方药对骨髓间充质干细胞增殖、成骨分化、迁移影响的实验研究-中医骨伤科学专业论文 word格式

中文摘要目的：研究不同接骨方药含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及成骨分化的影响，初步探讨传统接骨方药治疗骨折的作用机理及其治疗骨折的有效成份。方法：通过制备七厘散、桃红四物汤，依据“人和动物体表面积折算的等效剂量比率表”计算 SD 大鼠灌胃剂量，以临床 5 倍剂量给大鼠灌胃制备含药血清，灌服等体积生理盐水制备的血清作为空白对照组血清。采用贴壁筛选法培养大鼠骨髓间充质干细胞，以 5%浓度含药血清干预第三代 BMSCs，研究不同接骨方药对大鼠 BMSCs 增殖及成骨分化的影响。BMSCs 增殖情况通过 MTT 法检测分析；成骨分化情况通过对 BMSCs 成骨诱导后第 3、6、9、12 天测定细胞碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性、第 6、11、 16 天测定钙盐沉积量、骨钙素分泌量以及Ⅰ型胶原，比较各组间差异，从而探讨不同接骨方药含药血清对大鼠 BMSCs 增殖及成骨分化的影响。结果：不同接骨方药中七厘散促进骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化作用最为显著且较桃红四物汤有意义，主要表现 MTT 值、ALP 活性、钙盐沉积、骨钙素、Ⅰ型胶原等。结论：1)不同接骨方药对骨髓间充质干细胞的增殖、成骨分化均有促进作用。 2)通过实验发现，不同接骨方药的代表药物中，七厘散促进骨髓间充质干细胞增殖和向成骨细胞分化的作用较桃红四物汤强。关键词：七厘散；桃红四物汤；含药血清；骨髓间充质干细胞；增殖；成骨性分化；ABSTRACTObjective: To study the effects of serums from rats fed with various Chinese herbal drugs on the proliferation and osteogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) from rats. To explore the mechanism and active principle of Chinese herbal drugs in promoting the healing of fracture.Methods: Qilisan and Taohongsiwutang were prepared by some methods. According equivalent dose formula use for animal and person.Rats were giving Qilisan and Taohongsiwutang by 5 dose with people and their serum were obtained. The control serum was obtained by giving equal volume normal saline. The rat bone marrow mesenchymal stem cells were isolated and purified by whole marrow method. The serum was supplemented into the culture medium of the 3rd generation of rat bone marrow mesenchymal stem cells with the 5% concentration. The proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells was analyzed byMTT reduction assay.The ALP activity were determined at the 3th、6th、9th、12th day. TheBoneglaprotein (BGP), calcium deposition and type Ⅰ Collagen were determined at the 6th 11th、16th day.The osteogenic differentiation markers were compared among each group,toinvestigate the effects of serums from rats fed with various Chinese herbal drugs on the proliferation and osteogenic differentiation of BMSCs from rats.Results: Various Chinese herbal