肌酸激酶石宗华课件.pptVIP

肌酸激酶及其临床意义 郑大五附院重症医学科 石宗华 * 什么是肌酸激酶（CK）？ CK升高有什么意义？ CK有几种同工酶？ CK家族成员有哪些？ CK-MB升高-----心肌梗死？ CK-MB不升高-----排除心肌梗死？ CK-MB能高于CK么？ 有哪些因素能导致CK升高？ ？？ * 肌酸激酶 肌酸激酶( CK)，旧称磷酸肌酸激酶，参与能量代谢，分子量81000，两个亚基组成 ADP+磷酸肌酸 CK ATP+肌酸 CK在人群中不是正态分布，正常人CK变动与人种、性别、年龄、肌块大小、体力活动等有关。安静时血清CK总活性：男：10-100U/L，女：10-60 U/L 临床上测定的血清CK指的是CK的总活性 熬夜、过劳、剧烈运动、某些药物(如秋水仙碱)也会使肌酸激酶增高 运动后人体血清CK活性升高：一是运动使肌细胞膜通透性升高；二是运动导致肌细胞损伤 血清中CK升高一般提示含CK的细胞通透性增高或细胞的破坏 * CK家族成员分布及比例 CK分布于骨骼肌、心肌、脑、 胃肠平滑肌、甲状腺、肺组织中。以骨骼肌含量最高，其次为心肌，再其次为脑和胃肠平滑肌 CK有四种同功酶形式：肌型(CK-MM)、脑型(CK-BB)、杂化型(CK-MB)和线粒体型(CK-MtMt)。CK-MM型主要存在于各种肌肉细胞中，CK-BB型主要存在于脑细胞中，CK-MB型主要存在于心肌细胞中，CK-MtMt型主要存在于横纹肌线粒体中 CK主要存于胞浆中，少量存在于线粒体、微粒体中 正常情况下，CK极少透出细胞膜，细胞外液中CK浓度仅是细胞内液的1/10000-1/1000 * CK亚基 CK同工酶 主要组织部位 M MM 骨骼肌、平滑肌 B MB BB 心肌 脑 Mt MtMt 肝脏、横纹肌线粒体中 CK及其同工酶的分布表 * 临床上，CK家族除了CK-MM、CK-BB、CK-MB、CK-MtMt外，还存在巨CK1(M-CK1)、巨CK2(CK-mt) 巨CK1(M-CK1)：巨分子酶，多为CK-BB与IgG或IgA的复合物，少数为CK-MM与IgG或IgA的复合物 巨CK2(M-CK2或CK-mt):存在于线粒体膜上，线粒体崩解时随碎片进入血液，呈低聚状态 M-CK1不被抗CK-M抗体抑制，活性被100%测出。故在测CK-MB活性时，测得的CK-MB活性假性增高 M-CK2绝大多数不影响CK总活力升高 * 常见CK家族成员分布及比例列表 小肠 20 1.1 2.7 8 子宫 前列腺 5-16 2-20 64-93 34-39 2-6 59-60 甲状腺 4-26 0-1 73-96 * CK同工酶检测方法包括1.酶活性法：免疫抑制、电泳、离子交换层析、放射免疫、化学荧光等；2.酶质量法：mass质量法等 1.免疫抑制法:具有简单、快速、不需手工操等特点，临床多用。 原理：正常人血清CK-BB极少可忽略不计，应用单克隆抗体与CK中的M亚基结合，抑制CK-MM及CK-MB中的M亚基活性，通过速率法测定B亚基, 结果乘以2即CK-MB活性 免疫抑制法的原理是假定标本中无CK-BB活性。但在某些因素下CK-BB升高, 必定影响CK-MB测定结果，甚至出现CK-MB＞CK 此法所测值常高于其它方法：可能与CK-MM分为1、2、3亚型有关。一般抗MM血清对MM3抑制较好，但对MM1抑制较差。正常情况下血中MM亚型的存在以MMl为主，故导致正常值明显偏高。AMI第一天血中以MM3为主，但第二天以后则以MMl为主 临床CK常用检测方法 * 免疫抑制法检测CK-MB活性原理图解 * 注意，红细胞及许多组织中都含有腺苷酸激酶(AK)，催化下列反应：2ADP AK ATP+AMP,也影响CK-MB 的测定结果偏高，故测定CK活性尽量不用溶血标本 AMP及五磷酸二腺苷（AP5A）能竞争性地抑制肌肉及红细胞中的AK，试剂中加入AMP及AP5A，能有效抑制AK的干扰, 抑制率可达90%～95% NaF能抑制AK,但也能和CK激活剂Mg2+ ，逐渐形成MgF2沉淀，所以NaF与Mg2+分开配制，临时混合 CK同工酶半衰期短，故酶活性的高低受标本采集时间的影响也较大 * 2.琼脂糖凝胶电泳法：特点：准确可靠；缺点：灵敏性较差 原理：在电泳条件下，CK-BB迁移最快，CK-MB居中，其次CK-Ig的复合物（巨CK1型）， CK-MM最慢 电泳法血清CK同工酶正常值：CK-MB5%；CK-MM94%-96%；CK-BB 无或极少量 3.酶质量法-mass质量法：其原理是利用CK-MB抗原性，根据抗原抗体反应测CK-MB酶蛋白浓度，单位为μg/L。准确性高，但