09细胞凋亡与疾病推荐.pptVIP

* 三. 流式细胞仪检测 1. PI染色 ，定量测定DNA含量，亚二倍体峰 2. Annexin-Ⅴ作为探针可结合磷脂酰丝氨 酸， 标记出早期凋亡的细胞 * 正常组 IR组 * 复习思考题 1．何谓凋亡？ 2．凋亡与坏死有什么区别？ 3. 细胞凋亡的生理学意义有哪些？ 4．凋亡细胞的DNA电泳为什么出现梯状条带？ 5．细胞凋亡过程有哪几个阶段？ 6．细胞凋亡的可能机制是什么？ 7．简述细胞凋亡与爱滋病发病的关系？ 8．在疾病防治过程中如何正确利用细胞凋亡机 制？ * 再 见 * 1. 引起的DNA损伤可激活P53基因。 2. 引起的DNA损伤可活化聚ADP核糖转移酶， 导致NAD快速耗竭，ATP大量消耗。 3. 引发脂质过氧化，诱导细胞凋亡。 4. 使膜通透性增加，促进Ca2+内流诱导细胞 凋亡。破坏线粒体膜，诱导细胞凋亡。 5. 激活Ca2+/Mg2+依赖的核酸内切酶 6. 活化核转录因子NF-kB和AP-1，促进凋亡 基因的表达。 * 二、钙稳态失衡在 细胞凋亡中的作用 * 细胞凋亡时，[Ca2+]i升高 人为升高[Ca2+]i可诱导细胞凋亡 [Ca2+]i升高 激活多种钙依赖性酶 凋亡 * 钙稳态失衡引起细胞凋亡的可能机制： 1．激活Ca2+/Mg2+依赖的核酸内切酶，降解 DNA链 2．激活谷氨酰胺转移酶→细胞骨架蛋白分子 交联→利于凋亡小体形成。 3．激活核转录因子→加速细胞凋亡相关基因 的转录。 4．Ca2+在ATP的配合下使DNA链舒展，→利于 DNA内切酶切割DNA。 * 三、线粒体损伤在 细胞凋亡中的作用 * 细胞凋亡时，线粒体形态改变不明 显， 主要出现功能上的变化。 其主要表现为： 1.线粒体内膜通透性升高 2.内膜跨膜电位下降 3.能量合成明显障碍 * * * 第四节 细胞凋亡与疾病 * * （一）细胞凋亡不足 1．肿瘤 发生机制 ：细胞增殖过度 细胞凋亡不足 存活大于死亡 细胞数目增加 BCL-2表达上调 凋亡不足 P53基因突变或缺失 * 2．自身免疫病 是自身抗体或致敏淋巴细胞对自身抗 原起反应造成自身组织破坏并引起临床症 状的一种疾病状态 。 正常：针对自身抗原的T细胞发生凋亡 胸腺功能异常时，针对自身抗原的T细 胞不能有效的凋亡，甚至增殖，导致自身 组织的免疫性损伤。 但对于靶细胞来讲为凋亡过度 * （二）细胞凋亡过度 心血管疾病 神经元退行性疾病 AIDS * 1．心血管疾病 * （1）心肌缺血与缺血-再灌注损伤 特点： ①缺血早期以凋亡为主，晚期以坏死为主。 ②梗死灶中央以坏死为主，周边以凋亡为主。 ③轻度缺血以凋亡为主，重度缺血以坏死为主。 ④一定时间内再灌注的凋亡比单纯缺血更严重。 ⑤急性严重的心肌缺血以心肌坏死为主，慢性 轻度的心肌缺血以心肌细胞凋亡为主。 * 心肌细胞凋亡机制： ①氧化应激 ②Fas蛋白上调 ③p53基因激活 * （2）心力衰竭 心衰时心肌细胞凋亡的可能诱导因子： ①氧化应激 ②压力或容量负荷过重 ③神经-内分泌失调 ④细胞因子（TNFα）的作用 ⑤缺血、缺氧 * 2．神经元退行性疾病 Alzheimer disease (阿尔兹海默病) Pakinson disease (帕金森氏病) Huntington disease * Alzheimer disease（AD) 表现：进行性痴呆，遗忘和近记忆丧失， 称早老性痴呆或老年性痴呆。 病理改变：大脑皮质萎缩、皮质神经元丢 失、广泛分布的皮质老年斑、脑实质和血 管壁有进行性β淀粉样蛋白沉淀、神经胶 质增生 AD患者神经元丧失的主要机制为细胞凋亡 * 可能诱导因素： β 淀粉 样 蛋白； 钙 超载 ； 氧 化应 激；神经生长因子分泌不足等。 可能机制： 致病因素→神经元→Ca2+内流↑→激 活β淀粉样蛋白合成基因→神经元 内β淀粉样蛋白↑→活性氧 NF- kB活化 神经元凋亡 * 3．获得性免疫缺陷综合征 （AIDS） AIDS由HIV感染引起 其主要机制是细胞凋亡使 CD4+淋巴细胞被选择性的破 坏，引起相关的免疫机能缺 陷。 * 导致CD4+淋巴细胞凋亡的因素 受HIV感染 胞融和成合胞胞感染HIV （1）糖蛋白120（gp 120 ）： 即发 凋HIV感 CD4 T 基因表HIV 染 巴 胞生长因子生 后 生 亡受 染使 + 细胞的Fas感 使 细 成减 达上调 强其对Fas 介导的凋少 的 4+泌TNF （2）合胞体形成：