pd-1在t细胞非霍金淋巴瘤外周血淋巴细胞中的研究.pdfVIP

学校代码：10023 学号：200901054 PD-1 在T 细胞非霍金淋巴瘤外周血淋巴细胞中 的研究 专业年级： 北京协和医学院临床医学专业2009 级 姓 名 ： 左孟轩 导 师 ： 周道斌（教授） 张薇（教授） 北京协和医学院 临床学院（北京协和医院） 血液内科 完成日期： 2017 年5 月20 日 目录 摘要 3 Abstract 5 前言 8 第一部分 PD-1 等共刺激因子在T-NHL 外周血Treg 细胞表面的表达的研究 10 1. 引言 10 2. 材料与方法 11 3. 实验结果 12 4. 讨论20 5. 结论22 第二部分 MTT 法检测T-NHL 患者及健康受试者外周血PD-1 （+ ）淋巴细胞的功 能差异 24 1. 引言24 2. 材料与方法24 3. 实验结果27 4. 讨论28 5. 结论29 第三部分 T-NHL 患者及健康受试者外周血PD-1 （+ ）淋巴细胞的基因表达谱差异 分析 30 1. 引言30 2. 材料与方法30 3. 实验结果33 4. 讨论39 5. 结论41 全文小结 42 参考文献 43 缩略词表 46 综述 47 致谢 55 独创性声明 56 摘要 背景 T 细胞非霍奇金淋巴瘤（T cell non-Hodgkin lymphoma, T-NHL ）是一组异质性 疾病，其恶性程度高，5 年总生存率仅为20-40% 。目前常规治疗方案都易复发，并 且一旦复发缺乏有效的挽救治疗方案。因此积极推动T-NHL 临床研究，探究其发病 机制及药物靶点应当成为淋巴瘤研究的重点。肿瘤微环境和肿瘤相关免疫是近年的 研究和治疗热点，外周血循环淋巴细胞是肿瘤患者机体免疫系统的重要组成部分， 已有研究证实淋巴瘤患者外周血T 细胞表面的共刺激分子中常存在异常表达，与肿 瘤的免疫逃逸相关。其中程序性死亡因子-1 （programmed death-1 ，PD-1）与肿瘤 免疫关系最为密切，然而循环淋巴细胞表面PD-1 在T-NHL 中的研究相对较少，本 文对PD-1 对于T-NHL 患者的机体免疫的影响及作用进行初步探讨。 目的 1. 明确PD-1 及相关共刺激分子在初治T-NHL 外周血Treg 细胞表面的表达及其治 疗后变化。 2. 探究T-NHL 患者与健康人外周血PD-1 （+ ）淋巴细胞功能的差异性。 3. 初步揭示T-NHL 患者外周血PD-1 （+ ）淋巴细胞功能差异性的分子基础。 方法 本研究共纳入2015 年9 月至2017 年4 月在北京协和医院诊治的60 例T-NHL 患者，和在健康体检中心查体的 65 名健康志愿者。采用流式细胞技术分析外周血 Treg 细胞表面PD-1及相关共刺激分子的表达水平，分析表达与患者预后间的关系。 并在患者治疗第2-6 疗程后，再次测定患者外周血T 淋巴细胞表面PD-1 及相关共 刺激分子的表达情况，探究表达与患者疗效的关系。利用磁珠分选10 例初治T-NHL 及10 例健康受试者的外周血PD-1 （+ ）淋巴细胞，进行体外培养，采用MTT 试验 + ）淋巴细胞功能，此外利用数字化基因表达 对比患者及健康受试者外周血PD-1 （ 谱测序技术分析患者及健康受试者外周血PD-1 （+ ）淋巴细胞基因表达谱差异，探 究功能差异的分子基础。