细胞化学染色课件课件篇.ppt

感谢您的关注！ * * 应用评价 NAS-DCE是粒细胞的特异酯酶，它是急性白血病形态分型时常规做的细胞化学染色，尤其有助于POX染色阳性的急粒急单的鉴别。 该实验敏感性较POX低，如有一定数量白血病细胞NAS-DCE染色呈阳性，可以肯定其中粒系成分的存在，阴性则不能排除有粒系成分的可能。 * ɑ-醋酸萘酚酯酶染色 ɑ-naphthol acetate esterase ɑ-NAE * 原理 ɑ-醋酸萘酚酯酶存在于单核细胞、粒系细胞和淋巴细胞中，是一种中性非特异性酯酶。血细胞内的ɑ-NAE在PH中性条件下，水解基质中的ɑ-醋酸萘酚释放出ɑ-萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性有色沉淀，定位于细胞内酯酶所在部位。 单核细胞系统可被氟化钠抑制，所以做ɑ-NAE时，需要同时做氟化钠抑制试验。 * ɑ醋酸萘酚 ɑ萘酚 ɑ醋酸萘酚酯酶 水解 重氮盐 不溶性有色沉淀 * 正常血细胞染色 单核细胞系统：分化差的原始单核细胞呈阳性，分化好的原始单核细胞呈阳性，幼稚单核及单核细胞呈阳性，可被氟化钠抑制。所谓抑制是指氟化钠实验的抑制率大于50%。 抑制前阳性率或阳性积分-抑制后阳性率或阳性积分 氟化钠抑制率= 前抑制阳性率或阳性积分 * 粒细胞系统：阴性或阳性，但不能被氟化钠抑制。 淋巴细胞系统：多属阴性，少数弱阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制。 其他细胞：巨核细胞和血小板呈阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制；少数有核红细胞呈弱阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制。 * 临床意义 主要用于 辅助鉴别急性白血病的类型： 1.急性单核细胞白血病中的细胞大多数呈阳性且较强，阳性反应能被氟化钠抑制。 2.急性粒细胞白血病中的原始粒细胞呈阴性或阳性，阳性反应不能被氟化钠抑制。 3.急性早幼粒细胞白血病中的早幼粒细胞呈强阳性，阳性反应不被氟化钠抑制。 * 4.急性淋巴细胞白血病中的原始淋巴细胞及幼稚淋巴细胞呈阴性至阳性，不被氟化钠抑制。 5.急性粒单核细胞白血病中的原始粒细胞呈阴性至阳性。反应不被氟化钠抑制；原始单核及幼稚单核细胞呈阳性且较强，阳性反应能被氟化钠抑制。 * 应用评价 ɑ-NAE染色是急性白血病形态学分型时常规要做的细胞化学染色，对单核细胞白血病与粒细胞白血病鉴别诊断意义较大。一般来说，ɑ-NAE在急性单核细胞白血病细胞中的阳性较强，但M3或M2b也可呈强阳性。 * 醋酸AS-D萘酚酯酶染色 naphthol AS-D acetate esterase NAS-DAE * 原理 NAS-DAE存在于单核细胞、粒细胞和淋巴细胞中，是一种中性非特异性酯酶。 血细胞内的 NAS-DAE在pH中性的条件下水解基质液中的醋酸AS-D萘酚，释放出AS-D萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联成不溶性的有色沉淀定位于细胞质内酶所在的部位。 * 正常细胞的染色反应 粒细胞系统中，原始粒细胞阴性或阳性，早幼粒细胞至成熟粒细胞均阳性，阳性反应不被氟化钠抑制，其他血细胞染色基本同ɑ-NAE染色。 * 临床意义 基本同ɑ-NAE，用以辅助鉴别急性白血病细胞类型。 * 应用评价 基本同ɑ-NAE * ɑ-丁酸萘酚酯酶染色 ɑ-naphthol butyrate esterase ɑ-NBE * 实验原理 ɑ-NBE主要存在于单核细胞中，是一种非特异性酯酶。血细胞中的ɑ-NBE在PH碱性条件下，水解基质内的ɑ-丁酸萘酚并释放出ɑ-萘酚，后者与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性有色沉淀，定位于胞质内酶所在的位置。 * 正常细胞染色反应 1.粒细胞系统：各阶段粒细胞皆阴性。 2.单核细胞系统：分化差的原始单核细胞呈阴性，分化好的原始单核细胞呈阳性，幼稚单核细胞及单核细胞呈阳性，阳性反应被氟化钠抑制。 * 3.淋巴细胞系统：T淋巴细胞、非T非B淋巴细胞可呈阳性，B淋巴细胞呈阴性。 4.其他细胞：巨核细胞、有核红细胞、浆细胞呈阴性或弱阳性，组织细胞也可呈阳性，但不被氟化钠抑制。 * 临床意义 与ɑ-NAE染色的临床意义相同： 1.急性单核细胞白血病中的细胞大多数呈阳性，阳性反应能被氟化钠抑制 2.急性粒