药物代谢酶简介知识研讨.pptVIP

;第一章节 研究创新药物的代谢相互作用;目录;前言;;;1.药物相互作用一般分为药动学相互作用和药效学相互作用两大类。药动学相互作用可发生在吸收、分布、代谢、排泄4个阶段, 其中代谢性相互作用发生率最高, 约占药动学相互作用40%，临床意义最为重要。 2.药物代谢性相互作用是指2种或2种以上药物同时或先后序贯用药时，对代谢环节产生影响，疗效增强或产生毒副作用，或疗效减弱甚至治疗失败。;前言;前言;;药物;B. 代谢性药物－药物相互作用;;;;建立有关药物代谢和药物相互作用信息包括：;;;;;;;研究方法—实验设计;;研究方法—体内研究;;;;代谢产物的收集与研究是药物代谢研究中最经典、同时也是十分有效的方法之一。 药物最终会通过与母核相关的一种或多种代谢物排出体外,因此,分离鉴定代谢产物可在一定程度上了解药物的代谢途径。 近年来,HPLC及GC-MS-MS,LC-MS-MS,LC-NMR及LC-MS-NMR等高速、高效、高灵敏度的分析方法已用于代谢产物的分析,可在检测出极微量代谢产物的同时鉴定代谢产物的结构。;研究方法——酶诱导能力的评价;布格呋喃对大鼠肝脏CYP450s的调控;混合探针法测定6种CYP同工酶活性方法的建立 布格呋喃对CYP450同工酶的抑制作用 布格呋喃多次给药对CYP450各同工酶活性影响;实验材料;1.混合探针法测定6种CYP同工酶活性方法的建立; 将布格呋喃加入微粒体中与CYP450同工酶探针药共同温孵,测定探针药代谢产物生成，反映布格呋喃对CYP450同工酶的抑制作用。 布格呋喃浓度为:50μM，混合探针底物浓度为:非那西丁/美芬妥英50/100μM;右美沙芬/双氯酚酸钠15/20μM;氯哇沙宗/咪达哇仑100/20μM。 实验结果如图：;抑制; 结果表明： 布格呋喃在1和10μg浓度下(胃肠道内可能达到的浓度)对CYP2C11和3A2同工酶有显著的抑制作用，但低浓度(0.5 μg ，血药峰浓度)布格呋喃对各同工酶均无显著抑制作用。由此可推断服用治疗剂量(4~8mg/kg)布格呋喃后可能会对胃肠道某些CYP有抑制作用，而在体内对肝脏CYP450则无强抑制作用。 ;(1)给药和肝微粒体制备 取雄性SD大鼠30只，随机分为对照组、布格呋喃给药组、地塞米松和乙醇组，每组5只动物。布格呋喃给药???量为4、16、64mg/kg，每日一次，连续七日；地塞米松组动物，腹腔注射地塞米松100mg/kg，每日一次，连续四日；乙醇组口服20%乙醇，连续3日；对照组给同体积0.5%CMC。末次给药后24h将动物处死，取肝组织制备微粒体。肝微粒体蛋白浓度和细胞色素P450总量测定同前。 ;;; 结果表明 布格呋喃多次给药可显著诱导CYP1A2和CYP2E1活性(高剂量组分别为对照组的3和1.8倍)，并显示一定的剂量-效应关系； 对CYP2C6和CYP2C11有不同程度的诱导作用(最高分别为对照组的1.6和1.65倍)；中剂量和高剂量对CYP2D2有轻度抑制作用(分别为对照组的76%和73%)；对CYP3A2活性无明显影响。 该结果表明，布格呋喃多次给药对CYP450整体表现为诱导作用。 ;;;;;;第二章节 药物代谢酶的种属差异;前言; 在药物的发现和开发中，人们面临的基本挑战之一是将动物的代谢资料和风险评价外推人。  P450酶存在有明显的种属差异，药物在动物和人体内的代谢途径和代谢产物可能是不同的。 ;;引起这种差异的主要原因如下;; 抗癌药物环磷酰胺的酶水解速率次序为： 小鼠≈田鼠大鼠犬猴人。 氧化水解酶在兔、小鼠体内活性很高 在大鼠体内较低 普鲁卡因在人体内迅速被酯酶分解 在马体内酯酶活性低 ;;主要表现： 药物在不同种属的血药浓度、血浆蛋白结合率、靶器官浓度和靶器官结合率等药动学参数的不同，导致药物作用的强弱和药效持续时间的长短不同。 ;;　不同种属的细胞色素 P450同工酶的组成和活性不同以及 P450酶的底物和产物的特异性等因素会导致药物在不同种属和人体内的代谢途径和代谢产物的差异。;5.药物代谢的底物立体选择性;研究补骨脂酚在人、比格犬和大鼠肝微粒体的体外 代谢动力学及种属差异。 应用MTT法检测HK-2细胞的存活率来评价补骨脂酚对HK-2细胞的毒性作用以及不同种属肝微粒体对其毒性的影响。 HPLC法分析补骨脂酚在3个种属肝微粒体孵育液中的剩余浓度，研究其在肝微粒体中的代谢稳定性和代谢动力学。;补