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天水市第一人民医院生化检验SOP文件 1 丙氨酸氨基转移酶ALT测定 天水市第一人民医院检验科 操作规程文件号 第3版 共2页 1999年1月20日起实施 本规程每2年复审一次 复审日期2005年12月30日 复审人 规程编写者 审批者 批准日期2005年12月30日 文件分发部门和/或个人 医务科保管者 院长办公室保管者 院档案室保管者 检验科主任 临床化学检验室 天水市第一人民医院生化检验SOP文件 2 丙氨酸氨基转移酶ALT测定 方法 酶速率法 原理 丙氨酸2-氧代戊二酸 ALT 丙酮酸L-谷氨酸 丙酮酸NADHH LDH L-乳酸NADH2O NADH氧化成NAD引起340nm处吸光度的下降其下降速度与样品中ALT活性成正比。 标本要求 1种类为及时分离的空腹血清、肝素抗凝血浆。 2数量采集静脉血3ml。 3保存2—80C保存可稳定7天。 试剂 本科使用伊利康生物技术有限公司提供的产品号为YZB/国1218—2003试剂盒为液体双试剂。AST质控液由RANDOX公司提供。各主要成份如下 试 剂 成 份 浓 度 R1 Tris缓冲液 100mmol/LPH7.5 NADH 0.25mmol/L LDH gt600U/L 防腐剂 适量 R2 Tris缓冲液 100mmol/LPH7.5 L-丙氨酸 500mmol/L 2-氧代戊二酸 15mmol/L 防腐剂 适量 仪器 TOSHIBA TBA—40FR全自动生化分析仪 OLYMPUS AU640全自动生化分析仪。 操作步骤 双试剂操作 加入物 空白管 样品管 蒸馏水??l 15 — 样品??l — 15 R1??l 200 200 混匀370C孵育1—5分钟 R2??l 100 100 天水市第一人民医院生化检验SOP文件 3 混匀370C延迟1分钟后在波长340nm处读取吸光度值每隔一分钟读1次共读3分钟并平均计算每分钟吸光度变化率△A/min。 结果计算 样品中ALT活性U/L △AU/min-△AB/minTV1000/6.22SVP 式中TV —总反应体积ul 6.22—NADH在340nm处的毫摩尔分子消光系数 SV—样品体积ul P —比色杯光径cm △AU/min—样品管平均每分钟的吸光度变化率 △AB/min—空白管平均每分钟的吸光度变化率 性能数据 1精密度批内lt6.0批间lt10 2准确度不准确度lt10 3线性范围600U/L 参考值 2—40U/L 临床意义 ALT活性在下列疾病可见增高 1.肝胆疾病传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎和胆囊炎等。 2.心血管疾病心肌梗塞、心肌炎、心力衰竭时的肝脏瘀血、脑出血等。 3.骨骼肌疾病多发性肌炎、肌营养不力等。 4.某些药物和毒物。 参考文献 中华人民共和国卫生部医政司编全国临床检验操作规程第二版南京东南大学出版社1997204 天水市第一人民医院生化检验SOP文件 4 门冬氨酸氨基转移酶AST测定 天水市第一人民医院检验科 操作规程文件号 第3版 共2页 1999年1月20日起实施 本规程每2年复审一次 复审日期2005年12月30日 复审人 规程编写者 审批者 批准日期2005年12月30日 文件分发部门和/或个人 医务科保管者 院长办公室保管者 院档案室保管者 检验科主任 临床化学检验室 天水市第一人民医院生化检验SOP文件 5 门冬氨酸氨基转移酶AST测定 方法 酶速率法 原理 L-天冬氨酸2-氧代戊二酸 AST 草酰乙酸L-谷氨酸 草酰乙酸NADHH MDH L-苹果酸NAD NADH氧化成NAD引起340nm处吸光度的下降其下降速度与样品中AST活性成正比。 标本要求 1种类为及时分离的空腹血清、肝素或EDTA抗凝血浆。 2数量采集静脉血3ml。 3保存2—80C保存可稳定7天。 试剂 本科使用伊利康生物技术有限公司提供的产品号为YZB/国1210—2003试剂盒为液体双试剂。AST质控液由RANDOX公司提供。各主要成份如下 试 剂 成 份 浓 度 R1 Tris缓冲液 80mmol/LPH7.5 NADH 0.25mmol/L MDH gt600U/L 防腐剂 适量 R2 Tris缓冲液 80mmol/LPH7.5 L-天冬氨酸 240mmol/L 2-氧代戊二酸 15mmol/L 防腐剂 适量 仪器 TOSHIBA TBA—40FR全自动生化分析仪OLYMPUS AU640全自动生化分析仪。 操作步骤 双试剂操作 加入物 空白管 样品管 蒸馏水??l 15 — 样品??l — 15 R1??l 200 200 混匀370C孵育1—5分钟 R2??l 100 100 天水市第一人民医院生化检验SOP文件 6 混匀370C延迟1分钟后在波长340nm处读取吸光度值每隔