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德国小蠊酸性磷酸酯酶测定条件方法研究 　　摘要： ［目的］ 探索德国小蠊（Blattella germanica）酸性磷酸酯酶的最佳测定条件。［方法］ 采用二次回归通用旋转组合设计方法建立德国小蠊酸性磷酸酯酶测定中缓冲液pH值、反应温度、水浴时间、底物浓度等测定条件的数学模型，根据该模型寻求测定条件的最优组合。［结果］ 本次试验得到回归方程y#710; = 0.181 57 - 0.012 08x1 + 0.028 75x2 + 0.025 58x3 - 0.003 83x4 + 0.001x1 x2 - 0.006 13x1 x3 + 0.000 625x1 x4 + 0.010 63x2 x3 + 0.000 125x2 x4 + 0.000 25x3 x4 - 0.008 37x12 - 0.002 62x22 - 0.004 75x32 - 0.009 87x42（R2 = 0.915 6，Se = 0.000 612 57）。方程的失拟性检验F = 3.59 0.05）；回归方程的显著性检验F = 12.39 F0.01（14，16） = 3.45（P 　　关键词：德国小蠊；酸性磷酸酯酶；二次通用旋转组合设计 　　 　　Methodological Research of Testing the Acid Phosphatase of Blattella GermanicaCAI Hui-zhen，SHEN Xiao-bing*（School of Public Health，Southeast University，Nanjing 210009，China） 　　Abstract：［Objective］ To find the best testing condition of the acid phosphatase of Blattella germanica. ［Methods］ Quadratic general rotary unitized design was used to study the relationship between buffer pH，temperature，reaction time，substrate concentration and absorbence，and to find the best combination of those test conditions. ［Results］ For the result regression equation we got，y#710; = 0.181 57 - 0.012 08x1 + 0.028 75x2 + 0.025 58x3 - 0.003 83x4 + 0.001x1 x2 - 0.006 13x1 x3 + 0.000 625x1 x4 + 0.010 63x2 x3 + 0.000 125x2 x4 + 0.000 25x3 x4 - 0.008 37x12 - 0.002 62x22 - 0.004 75x32 - 0.009 87x42（R2 = 0.915 6，Se = 0.000 612 57）. There has no missing critical factors for the equation（F = 3.59 0.05）and there was statistically significance（F = 12.39 F0.01（14，16） = 3.45，P 　　因此，n = mc + 2p + mo，且这n个点是分布在3个半径不相等的球面上，其中：mc个点分布在半径为ρc=的球面上；2p个点分布在半径为ργ=γ的球面上；mo个点分布在半径为ρo= 0的球面上。 　　本次试验共研究了4个因子，根据二次回归通用旋转组合设计试验的参数设计，本次试验的参数如下：p = 4；mc = 16；γ = 2；mo = 7（由参数设计表查得）； n = 31。 　　1.2.2 试验因素转换 参照二次回归通用旋转组合设计［7-12］，将本???试验因子转化为规范变量的因素水平，见表1。 　　 　　1.3 试验方法和安排 　　取室内饲养的德国小蠊雄虫若干只，取其中肠，加0.1 mmol/L冰冷醋酸缓冲液少许（pH值依表1而定）混合匀浆，于4 ℃、8 000 r/min，离心15 min，取上清液为酶源，待测。 　　根据4因子5水平二次回归通用旋转组合设计结构矩阵［11，12］，对31个组合进行试验，共重复3次，每次重复中各组合测2个样品，每样品测3次吸光度值。具体试验安排见表2。 　　2 结果 　　2.1 数学模型的建立 　　应用国