湖南师大分子生物学课件D-ding-2010.pptVIP

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湖南师大分子生物学课件D-ding-2010.ppt

正螺旋和负螺旋 Role of Satellite DNA 构成染色体的着丝粒、端粒、Y染色体长臂上的异染色质区; 高度重复序列不能转录,形成结构基因的间隔; 参与维持染色体的结构,与减数分裂联会有关。 遗传多态性 同一种类的不同染色体或不同个体之间某一条染色体上的相同区域或基因座上含有两个(或更多)稍微不同的DNA序列,为多形体, 该基因座位展示了遗传多态性, 是由突变导致的。 single nucleotide polymorphism ( SNP ,单核苷酸多态性),主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。它是人类可遗传变异中最常见的一种。 Simple sequence length polymorphism (SSLP,简单序列长度多态性),导致数组重复序列在长度上的变化。重复的每一不同长度都是一种不同的形式。 Restriction fragment length polymorphism (RFLP,限制性片段长度多态性):指限制性酶位点上的遗传差异(例如,靶位点上的碱基改变产生),这些差别引起相关限制性酶切割产生不同长度片段。 RFLP基本原理 特定生物类型的基 因组DNA经某一种限 制性内切酶完全酶解 后,会产生分子量不 同的片段。 点突变产生和去除 酶切位点。 插入和缺失造成酶 切位点间的长度发生 变化。 怎样确定核小体周围各部分DNA的长度 提问 5’ – ATAAACTATAAACTATAAACT – 3’ 3’ – TATTTGATATTTGATATTTGA – 5’ Drosophila果蝇 satellite DNA repeat (several million copies) n ATAAACT, 3.6x106 bp, 8% genome D4 Genome Complexity D4 Genome Complexity 聚合酶链反应-单链构象多态性分析(Single Strand Conformation Polymorphism Analysis of Polymerase Chain Reaction Products, PCR-SSCP)是近年来 发展起来的一种基因分析方法。 PCR-SSCP分析的基本程序为:首先PCR扩增特定靶序列,然后将扩增产物变性为单链,进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。DNA单链的迁移率除与DNA链的长短有关外,更主要的是取决于DNA单链所形成的构象。相同长度的DNA单链其顺序不同,甚至单个碱基不同,所形成的构象不同,电泳迁移率也不同。 该技术已被广泛用于癌基因和抗癌基因变异的检测、遗传病的致病基因分析以及基因诊断、基因制图等领域。 中心法则 核糖体 D5 The Flow of Genetic information遗传信息流 反转录病毒以RNA为模板进行反转录 很多生物能编辑信使RNA序列 原核生物中, RNA聚合酶转录起始于启动子,终止于它特异性结合的终止子。 产生的mRNA可能包含编码一个或多个蛋白的区域。 mRNA编码多个蛋白区域的情况下,信使RNA是多顺反子,编码这部分的DNA区域称为操纵子。 原核生物表达 mRNA的编码区在核糖体上被翻译成蛋白质, 该过程首先是核糖体在核糖体结合位点与mRNA结合,通过tRNA按遗传密码输送氨基酸从起始密码子到终止密码子把遗传信息翻译为氨基酸序列. 原核生物表达 真核生物中,转录发生在核内而翻译发生在细胞质中, 因此mRNA具有更长的寿命. pre-mRNA由三种RNA聚合酶中的一种来合成,通常只编码一个蛋白,单顺反子. 真核生物的表达 多数真核基因中,蛋白编码区被非编码的内含子所打断. pre-mRNA中的内含子必须被去掉以产生连续的蛋白编码序列外显子,该过程称剪接,由snRNP核内小核糖核蛋白的RNA-蛋白复合物介导。成熟mRNA随即被运出细胞核并在细胞质中经核糖体翻译成蛋白质。 真核生物的表达 RNA在核中通过在5’端加帽(7-甲基鸟嘌呤残基与mRNA5’末端通过5 ’ ,5’-三磷酸脂键连接)和3’端加poly(A)尾巴增加稳定性. Summary Prokaryotic chromosome: closed-circular DNA, domains/loops, negatively supercoiled, HU H-NS Eukaryotic chromatin: Histones (octamer: H2A, H2B, H3, H4)+146bp DNA Nucleosomes + H1 chromatosome + Linker DNA beads on string 30nm fiber fiber loop +

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