天然迈克尔反应受体分子的快速发现及活性研究-药学专业论文.docx

浙江大学硕_卜学位论文摘要摘要迈克尔反应受体分子为一类含有亲电共辘体系官能团的化合物，在化学、药理学以及化学生物学等领域有广泛应用。本文首先利用传统方法对植物伞花木(Eu尽co尽mbus 。avalerl’ei)进行研究，从中分离得到9个新化合物和11个已知天然产物，其中具有迈克尔反应受体官能团的2个苯乙酸衍生物、5个香豆素类化合物和1个黄酮类化合物显示出较好醒还原酶诱导活性。为提高天然迈克尔反应受体分子的发现效率，本文随后建立了 3种分析化学方法，分别为基于液相-质谱联用技术、基于氢氖标记技术和基于异硫氰酸荧光素探针的发现方法，并依次对禹州漏芦(Echl’noPs grijsii)、明日叶(Angelica keiskei)及丹参(salviamilttorrhl’za)提取物进行分析，从中发现3个炔醇类、1个查尔酮类和4个邻醒二菇类迈克尔反应受体分子，且这些迈克尔反应受体分子均表现出一定生物学活性。此外，本文对从禹州漏芦中得到的迈克尔反应受体分子PYDDT进行了作用机制研究，发现PYDDT对细胞内还原型和氧化型谷就甘肤含量比例的下调作用可引起Keapl的谷胧甘肤化修饰，进而激活N魂蛋白并诱导二相代谢酶的表达。最后，本文建立了一种可预测目标化合物是否为迈克尔反应受体分子的数学模型，从而使天然迈克尔反应受体分子的发现更具靶向性。关键词:迈克尔反应受体分子、液相一质谱联用、氢氖标记、异硫氰酸荧光素、谷胧甘肤化修饰、亲电指数浙江大学硕士学位论文摘要A BSTRA C TM iehaeladdition aeeePtorsarethem oleeulesw hich eontainelectroPhiliem oieties，and have w ide range ofaPPlieationsinthe fieldsofChem istry，Pharm aeology andChem iealBiology.In the Presentstud又traditionalsereening m ethod w as firstem Ployed to investigate the P lantE:I尽eo 尽m b zzs eavaleriei，from w hieh n ine neweom Poundsand eleven know n eom Poundsw ere isolated.Ftlrtllerbiologiealresearchindieated tw o benzeneaeeticaeid derivatives，fiveeoum arinsand oneflavonesh ow edmoderateNQOIindueingaetivities.InordertoimProvethesereeningeffieieney，threeanalytiealscreeningmethodsweredeveloPed，whichwereLiquidChrom atograPhyTandem Mass SPeetrometry一based sereening method，H州roge可DeuteriumLabeling一based screening m ethod and Fluoreseein Isothioeyanate一based sereeningmethod.Using abovesereeningmethods，threenaturalsoureesEehinol巧grlj’sii，Angeliea keiskeiand Salvia m iltiorrhl’za w ereinvestigated，and three alkynols，oneehaleonesand fourm iltironesw ereidentified asPotentiallybioaetiveM iehaeladditionaeeePtors.ThesubsequentlyNQOIinduetionassayverifiedthebioaetivitiesoftheseM iehaeladdition aeeePtors.N ext，the aetion m eehanism researeh suggested thataPotentNQOIindueing agentPYDDT eoulddePleteeellularlevelofglutathione andredueethe glutathione/glu tathione disulfide ratio，w hich could furthertriggerK eaPIs-glutathi