蛋白质工程课件苏教版.ppt

蛋白质是一切生命活动的体现者。 基因控制蛋白质的合成 蛋白质工程一般是先创造出适合人类需求的新基因，然后表达具有特定结构和功能的蛋白质。 关键技术：基因工程 蛋白质工程称为第二代基因工程 前提：了解蛋白质的结构和功能的关系 空间结构的测定： X射线晶体衍射法：三级结构 核磁共振 ：了解其构想 （ 一级结构的测定（氨基酸序列）） 2、蛋白质工程的基本原理 基本原理：基因改造（基因修饰和基因合成） 流程： 预期蛋白质功能→设计出预期的蛋白质结构→推测应用的氨基酸序列→设计DNA的脱氧核苷酸序列（基因改造）（基因工程） 某多肽链的一段氨基酸的序列是···—甲硫氨酸—色氨酸—苯丙氨酸—色氨酸—··· （部分氨基酸的密码子是：甲硫氨酸—AUG，色氨酸—UGG，苯丙氨酸—UUU/UUC) 怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。 蛋白质的改造（对蛋白质改造部位的多少） PCR技术是基因定点诱变的常用方法 非定点诱变： 对蛋白质的空间结构不完全了解时，采用非定点诱变改造蛋白质，不具有目的性和针对性，可产生意想不到的结果 二、蛋白质工程的应用 1、改造酶的结构，有目的地提高酶的热稳定性 三、蛋白质工程的进展和前景 1、前景诱人：如用此技术制成的 ，具有 、耗电少和 的特点。 2、难度很大：主要是目前科学家对大多数蛋白质的 的了解还很不够。 练习检测 练习检测 练习检测 练习检测 练习检测 练习检测 练习检测 练习检测 * 第三节 蛋白质工程 1、基因工程的应用 （1）基因工程的实质：将一种生物的 转移到另一种生物体内，使后者产生本不能产生的 ，进而表现出新的 。 （2）基因工程的不足：在原则上只能生产自然界已存在的 。 2、天然蛋白质的不足 天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。 3、蛋白质工程的目的 生产符合人类生产和生活的需要的 。 思考：蛋白质工程崛起的缘由？？ 基因 蛋白质 性状 蛋白质 蛋白质 一、蛋白质工程的概念和原理 1、蛋白质工程的概念 通过物理化学与生物化学等技术了解蛋白质的结构与功能，并借助计算机辅助设计、基因定点诱变和重组技术DNA技术改造基因，以定向改造天然蛋白质，甚至创造自然界不存在的蛋白质的技术。 基因工程一般只能生产自然界中已存在的蛋白质，不一定满足人类的需要。 如：改造干扰素和提高玉米赖氨酸含量 对天然蛋白质进行改造，你认为应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？ 答：毫无疑问应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造，主要原因如下： （1）任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，改造了基因即对蛋白质进行了改造，而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造，即使改造成功，被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。 （2）对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作，难度要小得多。 蛋白质工程的流程图 基因 DNA 氨基酸序列多肽链 蛋白质 三维结构 预期功能 生物功能 mRNA 转录 翻译 折叠 DNA合成 分子设计 中心法则 蛋白质工程 TAC ACC AAA ACC 或 TAC ACC AAG ACC ATG TGG TTT TGG ATG TGG TTC TGG 大改：设计并制造自然界中不存在的全新蛋白质，使之具有特定的氨基酸序列、空间结构和预期功能 中改：在蛋白质分子中替代某一个肽段或一个特定的结构域 小改：通过基因工程中的定点诱变技术，有目的改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸殘基，以改善蛋白质的性质和功能 利用人工合成带有突变点的诱变引物，通过PCR扩增而获得定点突变的基因，再通过基因工程的方法，将突变基因导入受体细胞，经过转录和翻译合成所需的蛋白质。 基因的定点诱变技术是改变蛋白质结构的核心之一 异亮氨酸 半胱氨酸 胰岛素改造 　 天然胰岛素制剂在储存中易形成二聚体和六聚体，延缓胰岛素从注射部位进入血液，从而延缓了其降血糖作用，也增加了抗原性，利用蛋白质工程技术将胰岛素B链由B28脯氨酸-B29赖氨酸改为B28赖氨酸-B29脯氨酸，则可降低其聚合作用，使胰岛素快速起作用。该速效胰岛素已通过临床实验。 　 提高酶的稳定性方法： ①改变氨基酸（如酵母菌的丙糖磷酸异构酶） 天门冬酰胺—转变为—苏氨酸 天门冬酰胺—转变为—异亮氨酸 稳定性提高5