大棚甜瓜病虫害拮抗微生物的选育[论文].doc

大棚甜瓜病虫害拮抗微生物的选育 摘要：针对大棚甜瓜生产过程中日益严重的病害问题，病害的微生物筛选出相应的拮抗菌通过生物间的竞争作用、拮抗作用、重寄生作用、交叉保护作用及诱发植物抗病性等，来抑制某些病虫害的繁殖和活动，以达到生物防治的目的。由于长期大量使用化肥、农药，生态环境严重恶化，自身对各种病虫害的抗性能力减弱，各种病虫产品农药残留的污染日渐严重，已严重影响产业产品外威胁到人们的身体健康和经济农业的可持续发展。类似情况在大棚蔬菜、各类水果、茶叶等其他经济作物的生产过程中均普遍存在，已严重的威胁到人们的身体健康和经济农业的可持续发展。作用、重寄生作用、交叉保护作用及诱发植物抗病性等，来抑制某些病虫害的繁殖和活动，以达到生物防治的目的。 生物防治具有许多优于化学防治的特点，如生物防治重在提供一个良好的植物生长环境，增加植物自身对病虫害的抗性，避免病原菌的侵染与扩散，抑制病虫害对植物产生危害，对人畜安全，不污染环境，不产生抗药性，仅杀伤或抑制防治对象，能参与生态环境的调控，保持生态平衡，起到长效的作用。因此在生产上急需开发新型高效拮抗微生物菌剂以替代化学农药。 国内在病害的防治上主要有农业防治法、化学防治法、生物防治法。但是国内在生物防治领域还比较落后，鲜见生物防治菌剂的使用，仍主要采用较生物防治主要是利用各种有益的微生物，通过生物间的竞争作用、拮抗菌作用、重寄生作用、交叉保护作用及诱发抗病性等，来抑制某些病原物的存活和活动。据研究，拮抗菌的作用机制主要包括如下五个方面：产生抗生素，拮抗蛋白的拮抗作用，溶菌作用，竞争作用，寄生作用等。 生物防治具有许多优于化学防治的特点，如显著改善作物生长环境，对人畜安全，不污染环境，不产生抗药性，仅杀伤或抑制防治对象，参与生态环境的调控，保持生态平衡，起到长效的作用。材料Samples） Mht 陕西眉县猕猴桃大田 Pg 陕西富平苹果大田 Fp 陕西富平甜瓜大棚，pH为6.5 SL 上海生活垃圾 QM 青海牦牛粪 QF 陕西源县蚯蚓粪 SF 上海发酵牛粪 1.2 病原菌 编号（No.） 菌 名（Name） 备 注（Remark） 1 甜瓜蔓枯病病原菌 病原菌接种于PDA斜面, 于4℃冰箱中保存。 1.3 培养基 1.3.1 细菌分离用培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（Beef Extract Peptone Medium）：牛肉膏 3g，蛋白胨 10g，NaCl 5g，琼脂 15-20g，pH 7.0-7.2，水 1000ml。 阿须贝培养基（Ashby Medium）：KH2PO4 0.2g ，CaCO3 5.0g，MgSO4?7H2O 0.2g， C6H14O6 10.0g，NaCl 0.2g，CaSO4?2H2O 0.1g，pH 7.0C6H12O6?H2O 10g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，MgSO4?7H2O 0.3g，FeSO4?7H2O 0.03g，MnSO4?4H2O 0.03g，Ca3(PO4)2 5g，pH 7.0～7.5C6H12O6?H2O 10g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 0.3g，KCl 0.3g，MgSO4?7H2O 0.3g，FeSO4?7H2O 0.03g，MnSO4?4H2O 0.03g，CaCO3 5g卵磷脂 0.2gpH 7.0～7.5C12H22O11 5.0g，Na2HPO4 2.0g，MgSO4?7H2O 0.5g，FeCl3 0.005g，CaCO3 0.1g玻璃粉 1.0g，pH 7.0。NY?227-94?微生物肥料Gauses No 1 Synthetic Medium）：KNO3 1.0g，FeSO4?7H2O 0.01g，KH2PO4 0.5g可溶性淀粉(先加少量冷水调成糊状加入) 20.0g，MgSO4.7H2O 0.5g，NaCl 0.5g，pH 7.2～7.4。临用时在已融化的高氏1号培养基中加入重铬酸钾溶液，以抑制细菌和霉菌生长。每300mL培养基中加3％重铬酸钾1mL(100mg/kg)。Potato Dextrose Agar Medium，PDA）：马铃薯 200g，葡萄糖 20g，琼脂 15-20g，pH自然，水 1000ml。 察氏培养基Czapek S Medium）：硝酸钠g，磷酸氢二钾 1g硫酸镁(MgSO4?7H2O) 0.5g氯化钾 0.5g硫酸亚铁 0.01g蔗糖 30g琼脂 20g蒸馏水 1000mL121℃灭菌20min。KH2PO4 1.0g，C6H12O6?H2O 10.0g，MgSO4?7H2O 0.5g蛋白胨 5.0g1％孟加拉红水溶液3.3mLKNO3 1g，pH 7.0-7.