培养基制备技术156h.pptVIP

《微生物工艺技术》 培养基制备技术① 一、培养基的组成 ?培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 ● 碳源: 可以构成微生物细胞和代谢产物中碳素的营养物质称为碳源。 ● 氮源：能被微生物利用以构成细胞物质或代谢产物中氮素的营养物质通常称为氮源。 ● 无机盐及微量元素 ? 微生物在生长繁殖和产生代谢产物过程中，需要某些无机盐和微量元素，如磷、镁、硫、钾、钠、铁、氯、锰、锌、钴等，作为其生理活性物质的组成或生理活性作用的调节物。 ? 不同微生物需要无机盐种类不同。 ? 不同微生物对无机盐的最适浓度要求不同。 ? 不同微生物在不同的生长阶段对无机盐的最适浓度要求不同。 ? 在生产中需通过试验来确定菌种对无机盐和微量元素的最适宜需求量。 ● 生长因子 ? 从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量有机物质均称生长因子，如氨基酸，嘌呤、嘧啶、维生素等。 ? 动、植物细胞的浸出物含有丰富的微生物所需生长因子，一般采用动、植物细胞浸出物来提供微生物的生长因子。 ● 前体 ? 某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中结合到产物分子中去，而其自身的结构并没有太大变化，但是产物的产量却因其加入而有较大提高，这类化合物称为前体。 ? 在青霉素生产中，加入玉米浆后，青霉素单位可从20U/mL增加到40U/mL，其主要原因是玉米浆中含有苯乙胺，它能被优先合成到青霉素分子中去，从而提高了青霉素G的产量。 ● 促进剂和抑制剂 ? 促进剂是一类刺激因子，不是前体或营养物，对细胞生长是非必需的，但加入后却能显著提高发酵产量。 ? 在发酵过程中加入抑制剂会抑制某些代谢途径的进行，同时刺激另一代谢途径活跃，以致可以改变微生物的代谢途径，从而获得人们所需的某种产物或使正常代谢的某一代谢中间物积累起来。 ● 水 ? 水是所有培养基的主要组成成分，也是微生物机体的重要组成成分，水在微生物代谢过程中占极其重要的地位。 二、培养基的类型 ●根据培养基的物理状态划分 ●按培养基营养物质的来源划分 ● 按培养基的用途划分 ● 按培养基用于生产的目的划分 三、工业培养基的选择和配备原则 ● 工业培养基的选择原则 1. 能够满足生产菌生长、代谢的需要。 2. 目的代谢产物的产量最高。 3. 产物得率最高。 4. 生产菌生长及代谢迅速。 5. 减少代谢副产物生成。 6. 价廉并具有稳定的质量。 7. 来源广泛且供应充足。 8. 有利于发酵过程的溶氧与搅拌。 9. 有利于产物的提取和纯化。 10. 废物的综合利用性强且处理容易。 ● 工业培养基的配制原则 1. 根据微生物的营养需要配制培养基 ? 设计一种既有利于菌体生长又有利于代谢产物生成的培养基。 2. 营养成分的恰当配比 ? 无论对菌体生长还是代谢产物生成，营养物质之间应有适当的比例，不同菌株、不同代谢产物的营养需求比例不一样。 3. 渗透压 ? 对生产菌株来说，培养基中任何营养物质都有一个适合的浓度。 4. pH ?各生产菌株有其生长最适pH和产物生成最适pH范围，一般，霉菌和酵母菌比较适于微酸性环境，放线菌和细菌适于中性或微碱性环境。 5. 氧化还原电位 ? 培养基的氧化还原电位一般对大多数微生物生长的影响不大；但对于专性厌气细菌，由于自由氧的存在对其有毒害作用，往往需要在培养基中加入还原剂以降低氧化还原电位。 思考题 ? 1. 培养基的组成有哪些? 各有什么作用? ? 2. 简要说明培养基的类型。 ? 3. 工业发酵培养基的选择原则是什么? ? 4. 培养基配制时应注意哪几方面? 甲 100m3 发酵罐 放罐体积80m3 谷氨酸产酸水平120g/L 单罐产量 9.6吨 投入的葡萄糖总量 16吨 糖酸转化率 9.6÷16=60% 每吨葡萄糖能生产0.6吨谷氨酸 每生产1吨谷氨酸需1.67吨葡萄糖 乙 100m3 发酵罐 放罐体积80m3 谷氨酸产酸水平120g/L 单罐产量 9.6吨 投入的葡萄糖总量 19.2吨 糖酸转化率 9.6÷19.2=50% 每吨葡萄糖能生产0.5吨谷氨酸 每生产1吨谷氨酸需2吨葡萄糖 100m3 发酵罐 放罐体积78m3 谷氨酸产酸水平130g/L 糖酸转化率60% 放罐体积80m3 谷氨酸产酸水平130g/L 糖酸转化率55% 放罐体积75m3 谷氨酸产酸水平120g/L 糖酸转化率61% 产量与得率 的变化趋势 不一定一致 菌体生长及代谢速度 生 产 周 期 甲：操作周期40h 乙：操作周期44h 副产物生产量 影响 发酵 得率 提取 操作 原料价格 影响 生产成本 原料质量 影响 生产率值 原料来源 生产连续性、 运输成本 黏度等性质 传质 影响 影响