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阶段评估检测(八)
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1.(12分)中国科学家成功将人肝再生增强因子(hALR)的基因导入羊的乳腺上皮细胞中,,hALR。请回答下列问题:
(1)mRNA,________片段,,________文库,hALR基因,hALR基因相比________(填“有”或“没有”)区别。?
(2)得到hALR基因后,hALR基因,PCR技术扩增。扩增过程包括:____________________、在________酶作用下延伸,,
(3)目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是转基因生物的DNA上是否________。?
(4)人的hALR基因能够在羊乳腺细胞表达出相同的hALR,________。?
【解析】(1)以mRNA为模板,通过逆转录产生多种cDNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中,该受体菌群体叫做cDNA(部分DNA)文库;从该文库中获取的DNA没有启动子、内含子和终止子等,因此这样获得的基因与人的肝细胞中的hALR基因相比有区别。
(2)PCR技术扩增过程包括:目的基因解链为单链、引物与单链相应互补序列结合、在热稳定DNA聚合酶作用下延伸,如此重复循环。由于DNA分子的两条链是反向平行的,且延伸总是从3′→5′,若图中箭头表示一条引物结合模板的位置及扩增方向,则另一条引物的位置及扩增方向如图:
(3)目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是转基因生物的DNA上是否插入了目的基因。
(4)由于生物共用一套遗传密码子,因此人的hALR基因能够在羊乳腺细胞表达出相同的hALR。
答案:(1)cDNA(互补DNA) cDNA(部分DNA) 有
(2)引物与单链相应互补序列结合 Taq(热稳定DNA聚合或DNA聚合)
(见图)
(3)插入了目的基因 (4)共用一套密码子
2.(12分)如图为某种哺乳动物体细胞核移植过程图,
(1)①处需要用________等处理,;O2和CO2,CO2________。?
(2)卵母细胞在体外培养到________时进行去核。与去核卵母细胞融合的供体细胞培养一般不会超过10代,____________________。激活受体细胞除了用电刺激的方法外,________(写一种实际方法)。?
(3)动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植的原因是_______________。?
【解析】(1)贴满瓶壁的细胞需要用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖。细胞培养需要的CO2的主要作用是维持培养液的pH。
(2)由于减数第二次分裂中期的卵母细胞核的位置靠近第一极体,用微型吸管可一并吸出细胞核与第一极体;细胞一般传至10代后就不易传下去,一般来说,细胞在传至10~50代左右,增殖会逐渐缓慢,以至于完全停止,这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化,与去核卵母细胞融合的供体细胞培养一般不会超过10代,原因是保持细胞正常的二倍体核型。用物理或化学方法可以激活受体细胞,使其完成细胞分裂和发育进程,具体的方法有电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等。
(3)动物胚胎的细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易,而动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难,因此,动物体细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植。
答案:(1)胰蛋白酶 维持培养液的pH
(2)减数第二次分裂中期 保持细胞正常的二倍体核型 钙离子载体(或乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)
(3)动物胚胎细胞分化程度低,恢复其全能性相对容易,而动物体细胞分化程度高,恢复其全能性十分困难
3.(14分)(2018·潍坊模拟)如图表示中国科研人员对树鼩精原干细胞进行遗传修饰后,:
(1),________________对自身细胞代谢造成障碍。?
(2)图中涉及的基因工程的核心步骤是__________________,________技术将GFP基因导入树鼩精原干细胞。?
(3)利用PCR技术扩增GFP基因需要________酶,GFP基因能在树鼩体内表达的原因是______________________________________。?
(4)图示过程与通过体外受精培育转基因动物相比,_____中继续培养的麻烦,________时期进行胚胎移植的难题。?
【解析】(1)根据动物细胞培养过程中的条件可知,定期更换培养液的目的是防止细胞代谢产物的积累对自身细胞代谢造成障碍。
(2)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建,将目的基因导入动物细胞一般采用显微注射技术。
(3)PCR技术的原理是DNA的双链复制,利用PCR技术扩增GFP基因需要DNA聚合酶,外源的GFP基因能在树鼩体内表达的原因是所有生物共用一套遗传密码。
(4)图示过程与通过体外受精培育转基因动物相比,避免了将受精卵移入发育培养液中继续培养的麻烦,同时也克服了胚胎
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