高考生物一轮复习考点加强课7微生物的筛选、鉴定、分离与计数学案.docVIP

考点加强课7 微生物的筛选、鉴定、分离与计数 从近五年全国卷高考看，《生物技术实践》专题的命题绝大多数立足于微生物培养、应用、分离、计数等。答题过程中须明确所有操作都要围绕着“目的”进行： （1）如果实验目的是分离某种特定的目标微生物；关键点在于如何依据该微生物某方面特点制备特定选择培养基； （2）如果是测定细菌的数量，则必须 【例证】 （2014·全国卷Ⅰ）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题。 （1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将　　　　分解成　　　。 （2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成　　　　色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的　　　　。 （3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）： 酵母膏 无机盐 淀粉 琼脂 CR溶液 水 培养基甲 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ 培养基乙 ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ 注：“＋”表示有，“－”表示无。 据表判断，培养基甲　　　　（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是　　　　　　　　　　；培养基乙　　　　（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是_____________________________。 解析　（1）纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，如下图： （2）刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过观察是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 （3）分离和鉴别纤维素分解菌的培养基为固体培养基，且需以纤维素为唯一碳源。 答案　（1）纤维二糖　葡萄糖　（2）红　透明圈 （3）不能　液体培养基不能用于分离单菌落　不能　培养基中没有纤维素，不会形成CR—纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 1.分离微生物的原理与措施 （1）原理：自然环境中的微生物是混杂在一起的，因此分离获得纯培养物应首先采用的方法是将单个的细胞与其他细胞分离，再给细胞提供合适的营养和条件，使其生长成为可见的群体。 （2）常用措施 ①接种过程中尽量使细胞分散开来，如平板划线法、稀释涂布平板法。 ②运用选择培养基的作用特点，在培养基中添加某种特定的物质，抑制不需要的微生物的生长，促进所需微生物的生长。 2.选择培养基四种常见制备方法或实例 下面是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。 实验步骤： ①把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面，进行培养。 ②待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基2上，随即再影印到含有链霉素的培养基3上，进行培养。 ③在培养基3上出现了个别抗链霉素的菌落，将其挑选出。 （1）配制培养基时除了满足基本的营养条件外，还需满足微生物生长对特殊营养物质、　　　　、　　　　的要求。 （2）从功能上看，含有链霉素的培养基属于　　　　培养基。若在培养基中加入伊红和美蓝，则培养皿中长出的菌落颜色为　　　　。由图可知，1号培养基接种的方法为_________________________________________。 （3）对2和3进行比较，在2上找到与3上相应的菌落，挑取其中一个菌落接种到　　　　（填“含链霉素”或“不含链霉素”）的培养基上，如果有较多的菌落出现，则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之　　　　（填“前”或“后”）。 （4）3中的菌落比1、2中的菌落少很多，这说明了基因突变具有　　　　的特点。 解析　（1）配制培养基时在提供几种基本营养条件的基础上生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。（2）链霉素是抗生素，对大肠杆菌具有选择作用。在伊红和美蓝培养基上.大肠杆菌菌落颜色为黑色。由题图可知，1号培养基接种的方法为稀释涂布平板法。（3）培养基2和培养基3上相同的菌落，是具有相同性状的大肠杆菌形成的，将培养基2中一个相应菌落接种到含链霉素的培养基上，若出现较多的菌落，则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之前。（4）抗链霉素性状是大肠杆菌基因突变后获得的性状.3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明了 答案　（1）pH　氧气 （2）选择　黑色　稀释涂布平板法 （3）含链霉素　前 （4）频率低/低频性 影印法接种的具体过程是：将待测的浓缩菌悬液涂在合适的平板上，等其长好后作为母平板（每个平板上的菌落控制在30～300个）；用一小块灭菌的丝绒固定在直径较平板略小的圆柱形木块上，构成印章（即接种工具）；然后把长有菌落的母