2017-2018学年高二生物人教版选修一教学案：专题5+课题2+多聚酶链式反应扩增DNA片段+Word版含答案.docVIP

一、PCR扩增的原理和过程细胞内DNA复制的条件 原料 4种脱氧核苷酸 模板 2条DNA母链 酶 解旋酶和DNA聚合酶 引物 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸2.PCR扩增的原理及条件(1)PCR(多聚酶链式反应)：一种体外迅速扩增 DNA片段的技术。它能以极少量的 DNA为模板在短时间内复制出上百万份的DNA拷贝。(2)原理：DNA的热变性原理即：(3)扩增方向：总是从子链的 5′端向 3′端延伸。(4)条件模板：DNA。引物：能分别与 DNA两条模板链相结合的物质。原料：4种脱氧核苷酸。酶：耐高温的DNA聚合酶一般用聚合酶。其他条件：需要稳定的缓冲溶液和能自动调控温度的温控设备。 (5)引物一小段 DNA或 RNA能与DNA母链的一段碱基序列互补配对用于PCR引物的长度通常为20～30个核苷酸。的反应过程(1)变性 90 ℃以上时双链DNA解聚为单链。(2)复性：温度下降到50 ℃左右两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。(3)延伸：温度上升到72 ℃左右时溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在 DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新DNA链。二、实验操作及DNA含量的测定 1．实验操作程序准备―→移液―→混合―→离心―→反应。含量的测定(1)原理：利用DNA在 260_nm的紫外线波段的吸收峰曲线来测定相应含量。(2)计算公式：D