04－中药制剂的含量测定.pptVIP

第四章 中药制剂的含量测定 三、样品的分离净化 1. 沉淀法 2. 蒸馏法 3. 液-液萃取法 4. 色谱法 5. 固相微萃取法 6. 消化法 1. 沉淀法 * 过量的试剂若干扰被测组分的测定，应设法除去 * 杂质形成沉淀除去时，被测组分避免发生共沉淀 * 被测组分生成沉淀，可用重量法测定含量或者可重新溶解 20ml，置另一25ml量瓶中，作为空白溶液；各精密加入新制的 2％硫氰酸铬铵溶液3ml，摇匀，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀；置冰水浴中放置1小时，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以0.1mol/L盐酸溶液为空白，照紫外-可见分光光度法(附录Ⅴ A)，在520nm波长处分别测定吸光度，用空白试剂的吸光度分别减去对照品溶液的吸光度，以吸光度的差值为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线。 　　 2. 蒸馏法 * 挥发油 * 小分子生物碱（麻黄碱、烟碱、槟榔碱） * 丹皮酚 * 苦杏仁苷蒸馏后分解→HCN（氢氰酸） 3. 液-液萃取法（LLE） * 直接萃取法 * 离子对萃取法－－酸性染料比色法 4. 色谱法 （1） 硅胶、氧化铝 溶质在吸附剂表面的极性吸附作用 * 硅胶分离中性、酸性化合物，强烈保留碱性化合物 * 氧化铝吸附黄酮类，可用于生物碱、苷类的测定 4. 色谱法 （2） 键合相硅胶 十八烷基键合相硅胶（C18、ODS） 苯基键合相硅胶 氰基键合相硅胶 * 可分开脂溶性与水溶性物质，如苷元与苷 * 可纯化亲脂性药物 4. 色谱法 （3） 大孔树脂 极性→丙烯酰胺聚合物 非极性→苯乙烯和二乙烯苯聚合物 * 具有不同的极性，适宜吸附较大分子 * 可除多糖等水溶性杂质 4. 色谱法 （4） 聚酰胺 有机吸附剂→与溶质形成氢键产生吸附作用 * 用于酚、酸、醌类样品的净化分离 * 常用于黄酮类 例 枳壳 Ch.P（2005） 【含量测定】 照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。 供试品溶液的制备 取本品粗粉约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1.5小时，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水3～5ml使溶解，放冷，通过聚酰胺柱(50～80目，2g，内径1.8cm，湿法装柱)，以水25ml洗脱，弃去水液，再用甲醇50ml洗脱，收集洗脱液，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品含柚皮苷(C27H32O14)不得少于4.0％。 4. 色谱法 （5） 硅藻土、纤维素 亲水型填料→分配作用 * 可分离生物碱、酚性生物碱和中性物质 4. 色谱法 （6） 离子交换树脂 * 可用于除去样品中的离子、防止组分分解 * 常用于萃取样品中可离解化合物 5. 消化法 湿法消化 硝酸-高氯酸法 硝酸-硫酸法 硝酸-硫酸盐法 第二节 含量测定方法的验证 准确度 精密度 专属性 检测限 一、准确度 该方法测定结果与真实值或 参考值接近的程度 二、精密度 同一均匀样品，经多次取样测 定，所得结果之间的接近程度 三、专属性（选择性） 在样品中有其他成份（杂质、降解产物、辅料等）共存时，该分析方法对待测组分准确而专属的测定能力 四、线性 是指在一定范围内，样品浓度 与检测结果的线性关系 五、范围 指在达到一定精密度、准确度 和线性的条件下，该方法适用的高 低浓度或量的区间 六、耐用性（粗放度） 指测定条件稍有变动时，测定结果不受影响的承受程度 典型的变动因素 被测溶液的稳定性，样品提取次数，时间等。 液相色谱法典型的变动因素有：流动相的组成和pH值，不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱，柱温、流速等。 气相色谱法的变动因素有：不同厂牌或批号的色谱柱、固定相、不同类型的担体、柱温、进样口和检测器温度等。 薄层色谱法的变动因素有：吸附剂或薄层板的型号和厂牌，展开时的温度、湿度等。 七、检测限 待测组分能被检测出的最低量 TLCS定量方法 外标法 内标法 追加法（叠加法） 回归曲线定量法 外