微生物学 NO8 微生物遗传.pptVIP

第六节 真核微生物的遗传学特性 第七节 微生物育种 一、菌株的诱变和筛选 物理致变剂 致变剂 e.g. X-rays, g-rays, UV 化学致变剂 e.g. base analogs, nitrous acid, alkylating, arylating agents UVL VL Photolyase 例：紫外线诱变的分子基础 紫外线诱变的操作步骤 青霉素生产菌的诱变育种 菌株 NRRL-B25 的诱变过程 Strain Mutagen Yield (U/ml) Time NRRL-B25 250 1943 NRRL-X1612 X-rays 500 1943 NRRL-Q176 UV light 850 1945 NRRL-WIS-47-1564 UV light 850 1947 --- --- 50000 1977 对早期生物技术的发展贡献巨大； 适用于途径或基因未得到研究的菌株； 产生的变异程度相对较低； 变异的位点及性质不明； 没有相应的基因就不可能发生新功能。 诱变育种技术的特点 第八节 菌种保藏 性状稳定的菌种是微生物学工作最重要的基本要求，否则 生产或科研都无法正常进行。 影响微生物菌种稳定性的因素： a）变异； b）污染； c）死亡； 一、菌种的衰退与复壮 1）从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有 原有典型性状的菌种。 2）有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种 维护工作中不断筛选“正变”个体。 大量群体中的自发突变 菌种的复壮： a）纯种分离； b）通过寄主体进行复壮； 菌种衰退的特点： 二、防止衰退的措施 1）减少传代次数； 2）创造良好的培养条件； 3）经常进行纯种分离，并对相应的性状指标进行检查； 4）采用有效的菌种保藏方法； 三、菌种保藏 在一定时间内使菌种不死、不变、不乱 基本要求： 基本方法： 生活态 休眠态 培养基传代培养 寄主传代培养 冷冻 干燥 斜面、平板 液氮（-186）、低温冰箱 沙土管、冷冻真空干燥 冰箱内保存可2-3月 三、菌种保藏 由于微生物的多样性，不同的微生物往往对不同的保藏方法有不同 的适应性，迄今为止尚没有一种方法能被证明对所有的微生物均适 宜。因此，在具体选择保藏方法时必须对被保藏菌株的特性、保藏 物的使用特点及现有条件等进行综合考虑。对于一些比较重要的微 生物菌株，则要尽可能多的采用各种不同的手段进行保藏，以免因 某种方法的失败而导致菌种的丧失。 1） F+×F-杂交 杂交的结果：供体细胞和受体细胞均成为F+细胞 理化因子的处理可将F因子消除而使F+菌株变成F-菌株 F+菌株的F因子向F-细胞转移，但含F因子的宿主细胞 的染色体DNA一般不被转移。（滚环复制） Hfr菌株的F因子插入到染色体DNA上，因此只要发生接合转移过程， 就可以把部分甚至全部细菌染色体传递给F-细胞并发生重组 ，由此而得名为高频重组菌株。 2）Hfr ×F-杂交 染色体上越靠近F因子的先导区的基因，进入的机会 就越多，在F-中出现重组子的的时间就越早，频率也高。 F因子不易转入受体细胞中，故Hfr×F- 杂交后的受体细胞（或称接合子）大多 数仍然是F-。 3）F′×F-杂交 Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时，形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，特称为F′因子。 F′×F-与F+×F-的不同：给体的 部分染色体基因随F′一起转入受体细胞 a）与染色体发生重组； b）继续存在于F′因子上， 形成一种部分二倍体； 细胞基因的这种转移过程又常称为性导（sexduction）、F因子转导（F-duction），或F因子媒介的转导（F-mediated transduction） c）偶数次的交换才是有效重组 二、细菌的转导 （transduction） 由噬菌体介导的细菌细胞间进行遗传交换的一种方式： 一个细胞的DNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中 能将一个细菌宿主的部分染色体或质粒DNA 带到另一个细菌的噬菌体称为转导噬菌体 细菌转导的二种类型： 普遍性转导 局限性转导 1、普遍性转导（generalized transduction） 噬菌体可以转导供体染色体的任何部分到受体细胞中的转导过程 (1) 意外的发现 1951年，Joshua Lederberg和Norton Zinder