第二章基因概念-4.ppt

基因的概念 DNA的一级、二级和高级结构 DNA在体内稳定存在的因素 DNA的变性和复性，核酸分子杂交 重复基因、断裂基因、跳跃基因、假基因、重叠基因 原核、真核生物基因结构的异同 本章内容 是什么负责组织的特异拼接呢？ 体细胞中含有一种蛋白，它结合在第3个外显子上，阻止这个内含子的剪接。 在生殖细胞中缺乏这个蛋白，因此可以剪接第三个内含子产生编码转座酶的mRNA。 不育原则上是配子细胞的一种现象。 涉及P-M系统的杂交中，F1代具有正常的体细胞组织，在生殖细胞迅速开始分裂时，它们的性腺并不能发育。 P雄果蝇具有大量的P因子（P factors） M雌果蝇的染色体上都没有这种P因子。 P ♀ M♂ M ♀ P♂ 杂种不育依赖于杂交的性别定向，表明细胞质和P因子同样重要 细胞质的贡献被描述为细胞型（cytotyope) 在含有P因子的品系中有P细胞型 缺少P因子果蝇品系具有M细胞型。 杂种不育仅发生含有P因子的染色体进入M细胞型时，即雄性亲本有P因子，而雌性亲本却没有P因子的情况。 细胞型的作用 取决于66KD蛋白抑制转座的能力 这个蛋白质是卵中母体因子产生的(母本提供的正常细胞质因子都能抑制P因子的转座，从而后代可育) 在P品系中必须要有足够的蛋白来抑制转座的发生。含有P因子的雌果蝇与无论是否带有P因子的雄果蝇杂交，由于P细胞型的存在抑制了转座酶的合成或激活。 在P细胞型的卵细胞质中含有大量的相对分子质量为66×103的P因子转座抑制元件 但当雌果蝇为M型时，在卵中无阻遏物，这样导致了来自雄果蝇中的P因子使生殖细胞中转座酶活化。P因子发生转座，造成插入突变。这样杂交生下的子代出现染色体畸变和生育力下降 P细胞型能对多代后代发挥作用，表明卵中必须要有足够的阻遏蛋白，而且也要相当稳定，通过成体传递到下一代的卵中。 反转座子 反转录转座子(retrotransposon或retroposon)指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。这样的转座过程称为反转座作用(retrotrans—position)。 一些真核生物的转座子和寄生在这些生物中的逆转录病毒的前体有关，它们是通过RNA 中间体进行转座的。作为一类，这些元件被称为反座子(Retroposon)，有时也称为反转座子(Retrotransposon)。 原 核 生 物 与 真 核 生 物 中 均 存 在 反转录转座子的转座方式及特点 DNA → RNA → DNA ① 转座引起插入突变 ② 转座产生新的基因 ③ 转座产生染色体畸变 ④ 转座引起生物进化. 转座的遗传效应 转座子的应用 PB Transposon for Mammals 人类基因组计划通过测序发现人类大约有3万个基因，而大鼠，小鼠等哺乳动物基因组也被测序完毕，但是面对人们又产生了一个新的问题： 如何研究这些基因的功能？ 复旦大学发育生物学研究所发表在cell上一篇文章: 转座子的应用 上海复旦大学发育生物学研究所的科研人员将一种源于飞蛾的PB(PiggyBac)转座子（Transposon）用于小鼠和人类细胞的基因功能研究，在世界上首次创立了一个高效实用的哺乳动物转座因子系统，为大规模研究哺乳动物基因功能提供了崭新途径 这一成果被国际一流的生命科学杂志《cell》作为封面文章发表，第一作者丁昇是复旦大学三年级研究生。 转座子的应用 转座子的应用 这个源于飞蛾的PB转座子被赋予了“夸蛾因子”的中国名字，“夸蛾”是古文《愚公移山》中的大力士。 Sheng Ding, Xiaohui Wu, Gang Li, Min Han, Yuan Zhuang, and Tian Xu Efficient transposition of the piggyBac (PB) transposon in mammalian cells and mice.Cell. 2005 Aug 12;122(3):473-83. 《cell》审稿人评价：“these are landmark finding with the potential to alter the way mouse genetics is carried out worldwide, and with implications for human gene therapy”。 利用飞蛾体内一种常见的转座子PB，经过改造后作为重要的靶点，将PB转座因子高效插入小鼠基因组，还可以培育转基因小鼠。 同时，PB转座因子可在人等哺乳动物的细胞株中高效导入基因并稳定表达，为体细胞遗传学研究和基因表达提供了一个高效、便捷的新系统 用PB转座因子建立了小鼠