ang2sirna慢病毒载体干预裸鼠移植性恶性黑色素瘤的研究word格式论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 目 录 英文缩略词表…………………………………………………………………… 01 中文摘要………………………………………………………………………… 02 Abstract ………………………………………………………………………… 04 一、前言 ……………………………………………………………………… 06 二、实验内容…………………………………………………………………… 09 1、材料与试剂……………………………………………………………………09 2、实验方法………………………………………………………………………11 3、结果与分析……………………………………………………………………19 4、讨论……………………………………………………………………………26 5、结论……………………………………………………………………………29 参考文献 …………………………………………………………………………30 致 谢………………………………………………………………………………35 综述 ………………………………………………………………………………36 综述参考文献 ……………………………………………………………………41 攻读学位期间发表论文情况 ……………………………………………………44 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称及注释 A375 恶性黑色素瘤细胞 Ang Angiopoietin 促血管生成素 Ct Cycle threshold 循环数 DEPC diethyl pyrocarbonate 二乙基焦磷酰胺 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 EB ethidium bromide 溴化乙锭 EDTA ethylene diamine tetraacetic acid 乙二胺四乙酸 EGFP enhanced green fluorescent protein 加强绿色荧光蛋白 mRNA messenger ribonucleic acid 信使核糖核酸 PBS phosphate buffered solution 磷酸盐缓冲溶液 pNL-EGFP 带有绿色荧光蛋白的转移质粒 RISC RNA-induced silencing complex RNA 诱导的沉默复合物 RNA Ribonucleic acid 核糖核酸 RNAi RNA interference RNA 干扰 RT-PCR Real Time PCR 实时荧光定量 PCR siRNA small interfering RNA 小干扰 RNA Tie2 tyrosine kinase with immunoglobulin and 酪氨酸蛋白激酶 epidermal growth factor homology domains 受体 2（Tie2 受体） VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子 dsRNA double-stranded 双链 RNA RISC RNA-induced silencing complex RNA 诱导的沉默复合物 1 Ang2-siRNA 慢病毒载体干预裸鼠移植性恶性黑色素瘤的研究 摘要 目的：构建人恶性黑色素瘤裸鼠移植瘤模型，利用 Ang2-siRNA 慢病毒载体介导 的 RNA 干扰作用，沉默 Ang2 基因在裸鼠移植瘤中的表达，研究在体内 Ang2-siRNA 慢病毒对移植瘤中 Ang2 基因的影响，并检测移植瘤微血管密度，肿瘤的增殖情 况和体积，评价及初步明确 Ang2 表达水平、微血管密度与肿瘤增殖之间的关系， 为肿瘤的基因治疗提供一定的基础实验研究依据。 方法：1、将 15 雄性裸鼠随机分成空白组（PBS control group）、空载组（Vector control group）、实验组（RNAi group）3 组，每组 5 只。 2、正常培养、传代 A375 细胞，制成单细胞悬液，调整细胞密度至约为 5×107 个/ml。 3、在裸鼠右腋皮下，用 100μl 微量进样器接种制备好的 A375 单细胞悬液，100 μl/只，建立人恶性黑色素瘤裸鼠移植瘤模型。 4 、空白组、空载组、实验组 3 组裸鼠皮下移植瘤分别多点注射 PBS 、 pNL-EGFP-Vector 和 pNL-EGFP-Ang2-siRNA 慢病毒液，200μl/只，并于腹腔内 加强注射同种溶液 500μl/只，进行干扰试验研究。 5、观察并记录裸鼠移植瘤增殖情况和体积，统计、分析各组之间体积差异，并 绘制肿瘤生长曲线。 6、用实时荧光定量 RT-PCR 法检测移植瘤中 Ang2