c型利钠肽cnp对人精子功能及小鼠体外受精的影响分析word格式论文.docxVIP

中英文缩略词一览表缩写英文全称中文全称CNPC-type natriuretic peptideC 型利钠肽NPR-Bnatriuretic peptide receptor B利纳肽受体 BANPatrial natriuretic peptide心房利钠肽BNPbrain natriuretic peptide脑利钠肽cGMPcyclic GMP环磷酸鸟苷酸PKGprotein kinase G蛋白激酶 GPDEphospholipid the diethyl esterase磷脂酸二酯酶CNGcyclic nucleotide-gated channel环核苷酸门控通道mGCmembrane-bound guanylyl cyclase膜型鸟苷酸环化酶ARacrosome reaction顶体反应CBBcoomassie brilliant blue考马斯亮蓝BSAbovine serum albumin牛血清白蛋白HCGhuman chorionic gonadotrop(h)in人绒毛膜促性腺激素PMSGpregnant mare serum gonadotrop(h)in孕马血清促性腺激素IVFin vitro fertilization体外受精VEGFvascular endothelial growth factor血管内皮生长因子NPPCnatriuretic peptide precursor type CC 型利钠肽前体前 言随着生活节奏加快、竞争加剧，以及一些新兴产业中电波、辐射、新材料等带来 的环境污染日益严重，男性生殖状况日趋恶化，男性精液质量明显降低、精子数减少。 男性不育一直是威胁人类生殖健康的全球性问题。男性生殖健康研究迫在眉睫。受精是一个复杂精细的过程，进入女性生殖道内的精子需进行获能、识别、粘附 和穿透透明带、精卵的识别和融合，最终才能形成受精卵，只有功能正常的精子才能 完成这一复杂的过程。精子的功能主要包括运动功能和受精功能，任何一方异常都可 能引起不育。因此针对男性精子功能调节因素的研究一直是国内外研究的热点。C 型利钠肽(C-type natriuretic peptide，CNP)是一个新型的局部调节因子，是通过 与其特异性受体 NPR-B（natriuretic peptide receptor B）结合后影响第二信使 cGMP， 从而在局部特定组织以自分泌和旁分泌的方式产生其生物学效应[1]。近来研究表明 CNP 与生殖过程密切相关。在大鼠子宫中，CNP 和 NPR-B 随着动情周期改变呈特异 的表达，并在动情前期表达最高[2]。NPR-B 基因敲除的雌性小鼠可导致其生殖器官发 育异常并且不育，说明 CNP/NPR-B 对于雌性生殖器官的发育起关键作用[3]。2010 年 Science 发表一篇论文指出，成熟卵泡壁中颗粒细胞表达的 CNP，与卵母细胞周围的 卵丘细胞中的特异性受体 NPR-B 结合,促进细胞内 cGMP 表达，从而防止卵母细胞过 早发生减数分裂，以保证卵子成熟及排卵的同步化，而这对于正常女性生殖能力的维 持起到关键作用[4]。同样，近年来 CNP 对于男性生殖功能的影响也越来越引起重视，El-Gehani 等研 究发现利钠肽（包括 ABP、BNP、CNP）可以刺激胎鼠睾丸的睾酮合成，尤其是在 ANP ≥1×10-8 mol/L，BNP≥1×10-9 mol/L，和 CNP≥1×10-6 mol/L 下更为明显[5]。Xia 等 报道将人工合成的 CNP-22 加入到体外培养的支持细胞中，发现它会抑制支持细胞之 间的紧密连接，这说明 CNP 很可能通过旁分泌作用曲细精管而调节精子的运动以及 睾丸的血液供应[6]。Huang 等研究发现 CNP 可明显刺激在体外培养的支持细胞的一些 关键因子，如雄激素结合蛋白、抑制素及转铁蛋白的基因表达[7]。Nielsen 通过比较 猪不同组织中 CNP 表达水平时发现 CNP 在雄性生殖器官（如附睾、精囊及前列腺等） 中表达水平最高，其 mRNA 水平比其它组织高达 125 倍以上，CNP 在雄性生殖器官 中的这种特异性高表达水平表明了其在雄性生殖中的重要性[8]。另外 Chrisman 还发现 CNP 在猪精浆的浓度比猪脑的浓度高出 2000 倍，它能引起几个细胞系（NIH/3T3，Balb/3T3， Rat-2 等）中的 cGMP 明显升高，提示其在精子受精过程中起一定的作用[9]。在雄性生殖系统中，cGMP 级联反应可能在不同的水平影响睾丸生殖能力，尤其 影响精子的活力[10]，生殖细胞的发育[11]，Leydig 细胞睾酮的合成[12]，阴茎的勃起等[13]。 本课题组前期研究中还发现：在奥硝唑诱导的不育症大鼠中，其