dlc1 cmyc 在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达和临床意义word格式论文.docxVIP

三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明，本人完全意识到声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名：日期：三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位，并事先征得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。学位论文作者签名：日期：内容摘要目的：肿瘤的生长是多因素作用影响的结果。检测肿瘤抑制基因DLC1的mRNA 及其编码产物DLC1在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达情况，同时检测癌基因C-myc在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的中的表达。初步探讨：①DLC1和DLC1mRNA 与宫颈癌发生、发展的关系及其临床病理意义；②宫颈癌中C-myc和C-mycmRNA 的表达其临床病理意义；③探讨宫颈癌组织中DLC1与C-myc表达之间的关系。方法：收集宫颈组织的临床标本(正常宫颈7 例；宫颈上皮内瘤变Ⅰ～Ⅱ5 例；宫颈上皮内瘤变Ⅱ～Ⅲ或原位癌10例；早期浸润癌5例；中晚期癌9 例)。采用RT-PCR提取各组标本的mRNA，逆转录成cDNA，加入设计合成的各种基因的引物进行扩增，对扩增产物行琼脂糖电泳，利用灰度分析软件对电泳条带进行灰度计算，反映各种指标的相对表达值。采用免疫组化PV-9000二步法方法检测（正常宫颈15例；宫颈上皮内瘤变20例；宫颈癌40例）DLC-1、C-myc 蛋白在宫颈各种组织中的表达情况及与宫颈癌临床病理参数（年龄、临床分期、淋巴结转移状况、组织学分级等）的相关性进行分析。所有标本均经10%中性福尔马林液固定，石蜡包埋，常规制作切片，厚度4μm。每例切片经HE染色后光镜观察确立诊断。最后利用SPSS13.0软件包对各组数据进行统计学分析，P0.05被认为差异有统计学意义。结果：RT-PCR结果表明：DLC1mRNA在正常宫颈组织与宫颈癌中的表达存在明显差异（P＜0.05），正常宫颈组织与宫颈上皮内瘤变组织中的表达存在明显差异（P＜0.05），宫颈癌中呈低表达或缺失；C-mycmRNA在正常宫颈组织与宫颈癌中的表达存在明显差异（P＜0.05），正常宫颈组织与宫颈上皮内瘤变组织中的表达存在明显差异（P＜0.05），宫颈癌中呈高表达或缺失。用免疫组化结果表明：15例正常宫颈组织中DLC1的阳性表达率为100%（15/15例）；20例宫颈上皮内瘤变组织中DLC1的阳性表达率为70%（14/15例）；40例宫颈癌组织中DLC1的阳性表达率为45%（18/40 例）。三组之间DLC1 的阳性表达率有显著差异（χ2＝16.984，P＜0.01）。宫颈癌中DLC1阳性表达率低于正常宫颈组织，差异有显著统计学意义（χ2＝8.094，P＜0.01）；而宫颈上皮内瘤变与正常宫颈组织和宫颈癌组织之间的DLC1阳性表达率均无差异性（P＞0.05）。15例正常宫颈组织中C-myc的阳性表达率为0%（0/15例）；20例宫颈上皮内瘤变组织中C-myc的阳性表达率为45%（9/20例）；40例宫颈癌组织中C-myc的阳性表达率为60%（24/40例）。C-myc在三组之间的阳性表达率存在显著差异（χ2＝15.950，P＜0.01）。正常宫颈组织中C-myc的阳性表达率低于上皮内瘤变组织中的阳性表达率（χ2＝6.883，P＜0.01）和宫颈癌组织中的阳性表达率（χ2＝15.986，P＜0.01）。DLC-1 蛋白的表达与FIGO 临床分期（χ2=10.712，P＜0.05）、淋巴结转移（χ2=4.913，P＜0.05）和肿瘤分级相关（χ2=6.434，P＜0.05），差异有统计学意义。C-myc蛋白的表达与FIGO临床分期（χ2=8.062，P＜0.05）、淋巴结转移（χ2=2.698，P＜0.05）、肿瘤分级相关（χ2=6.563，P＜0.05），差异有统计学意义。DLC1与C-myc蛋白表达呈负相关，相关性有显著统计学意义（P＜0.01）。结论：初步证明宫颈癌中有DLC1和DLC1mRNA低表达或缺失，其表达水平明显低于正常宫颈组织，表明DLC1与宫颈癌的发生、发展有关。有淋巴结转移的宫颈癌病例，DLC1的表达均显著低于无淋巴结转移者，宫颈癌中DLC1的表达与和FIGO 分期、淋巴结转移、病理分