2019版高考生物大一轮复习 第47讲 基因工程、细胞工程、胚胎工程的解题策略优选课件.pptVIP

1．技术流程示意图 (1)基因工程 (2)植物组织培养 (3)植物体细胞杂交 (4)基因工程与克隆技术综合(含细胞工程与胚胎工程) (5)胚胎工程的操作流程 1．实例识记法：对于以上每一项技术可结合一个实例，如基因工程可结合抗虫棉的培育作实例理解并建立知识联系，将基因工程的操作工具、特点、流程步骤及各步骤的目的等联系在一起。 2．归纳总结法：将常考点归纳整理在一起，将这些流程图一般化，使其可以应对不同材料背景的变化。 3．比较分析法：将有联系、有相似性的知识进行比较、总结在一起，例如植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较整理。 1．阅读题干，读懂图形，初步判断是单一的基因工程、细胞工程还是胚胎工程，或者是几种技术的综合。 2．如果是基因工程的内容，基本辨别出目的基因的获取，基因表达载体的构建，将目的基因送入受体细胞，目的基因的检测与鉴定等。如果是细胞工程或胚胎工程，需大致了解考查的是什么。 3．分析流程中的每一步骤及示意图的含义及其文字说明。 4．从问题中获取信息，帮助解题。 1．文字叙述的题目要规范答题，防止表述不准确。选修3的本讲内容一般考查的都是一些生物学术语和名词。例如： 基因工程：限制酶、DNA连接酶、运载体、黏性末端、目的基因、构建基因表达载体、启动子、终止子、标记基因、抗原—抗体杂交等。 2．还有一些题目是要求填写原因的，有的已在许多高考题中形成了固定格式语言，有的在教材中有“因为……所以……”的总结。例如： (1)用两种不同的限制酶处理目的基因的优点是：防止目的基因自身环化，使目的基因按顺序接入质粒切口处。 (2)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，为什么要将内细胞团均等分割？这样的问题教材中都有原文回答。 答：若不均等分割，会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 2．基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 (2)基因表达载体的组成 3．将目的基因导入受体细胞 (1)导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。 (2)导入动物细胞：显微注射法。 (3)导入微生物细胞：感受态细胞法(用Ca2＋处理)。 4．目的基因的检测与鉴定 (1)插入检测：DNA分子杂交。 (2)转录检测：DNA—RNA分子杂交。 (3)翻译检测：抗原—抗体杂交。 (4)个体水平检测：抗性接种实验。 2．制备单克隆抗体过程中的两次筛选 [例1] (2015·江苏卷)胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体，图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白)。请回答下列问题： (1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是__________。 (2)图1中启动子是______________酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是____________________________ ______________________________。 (3)构建基因表达载体时必需的工具酶有________________________。 (4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于__________________________________________。 (5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段，这是因为__________________________________________________________________。 (6)根据图2中胰岛素的结构，请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是____________，理由是____________________________________ _______________________________________。 解析　(1)基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子、标记基因和目的基因，图1基因表达载体缺少终止子。(2)由图1可知，氨苄青霉素抗性基因是标记基因，能够将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来。(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有限制酶和DNA连接酶。(4)将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，可防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解。(5)由于β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸，而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸，所以用溴化氰处理相应的融合蛋白，可获得完整的A链或B链，β-半乳糖苷酶被切成多个肽段。(6)由于胰岛素共有两条肽链，每条肽