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绝密★启用前汶上补校生物专题训练三1．下图是利用生物工程技术获得转基因牛和转基因莴苣的过程图解，请回答下列问题：（1）图中获取大量目的基因的方法是______________，完成过程①、⑤需要使用的酶有_____________。（2）图中过程②常采用的方法是___________。检测目的基因是否导入受精卵，在分子水平上采用的方法是____________。（3）利用Ti质粒作为载体是由于该质粒上具有___________，它能将目的基因整合到受体细胞的__________上。（4）图中过程④需要借助___________技术才能获得转基因牛。如果莴苣的受体细胞是体细胞，需要通过___________技术才能获得转基因莴苣。2．重组人血小板生成素（rhTPO）是一种新发现的造血生长因子，下图为通过乳腺生物发生器产生rhTPO的相关过程。（1）在获取目的基因时（填“能”或“不能”)用SmaI，原因是______________________________，重组质粒中的标记基因是__________________________，标记基因的作用是_______________。（2）通常采用________技术将重组质粒导入受精卵，图中所示的过程与胚胎工程相关的有_____（至少写出两个）。（3）采用SRY—PCR方法对早期胚胎进行性别鉴定，样本细胞取自_____________，以Y染色体中含有的特异性SRY基因为探针，通过_____________方法进行胚胎的性别鉴定。3．人抗凝血酶Ⅲ由人体肝细胞产生，具有抗凝血、防血栓的作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产人抗凝血酶Ⅲ。请回答下列问题：（1）获取人抗凝血酶Ⅲ基因常用方法有两种，一种是从人的_______中获取该基因mRNA，逆转录成cDNA。另一种是PCR，根据人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的碱基序列，设计2种特异性引物，从染色体DNA上获取并扩增人抗凝血酶Ⅲ基因。在PCR过程中，两个引物是_________的结合位点，也是子链延伸的起点，dNTP（dATP、dCTP、dGTP、dTTP）在此过程中的作用是提供______________。（2）重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β–酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子组成，其中__________决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。（3）山羊的ES细胞来自早期胚胎干细胞。在饲养层细胞上培养时，ES细胞具有__________________的特性。将重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞时，该表达载体进入ES细胞的方式为__________。（4）对山羊进行同期发情和超数排卵处理，得到代孕母羊和多个卵母细胞，当卵母细胞培养至_________时，可去核并移入上述ES细胞的细胞核，完成核移植。为选择雌性胚胎，可在囊胚时取滋养层细胞做________分析用以鉴定性别。对于羊奶中是否含有人抗凝血酶Ⅲ，可用抗原–抗体杂交方法检测。4．转基因抗虫棉是人们应用较早的基因重组技术推广项目，目前转基因技术有了新的改进，如下图所示。请根据所学知识回答：（1）图中转基因过程通常选择的限制酶是_____________，启动子的作用是与__________识别和结合，从而驱动基因的转录过程。目的基因与载体结合主要依靠二者含有共同的_____________，将目的基因导入图中受体细胞一般采用_____________。（2）图中需要进行离体组织培养的过程是__________（用标号）。由棉株1获得单倍体苗的途径为：花粉通过诱导首先形成__________进而再分化为试管苗。植物组织培养的原理是每个细胞都具有__________的特点。在生物的生长发育过程中，由于细胞中____________，可分化为不同的组织和器官。5．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。现利用该病毒通过基因工程和单克隆抗体制备技术来生产预防和诊断该疾病的疫苗和抗体。请回答下列问题：（1）由该RNA病毒获得A基因过程中发生的碱基互补配对为______________。（2）制备A蛋白过程的核心是构建A基因表达载体，启动子和终止子也需要重新构建，以能被受体细胞的____________所识别，便于其催化转录过程。（3）将提取的A蛋白重复注射到小鼠皮下细胞，目的是获得更多的_______________，而使获得________细胞的几率大大增加，再通过扩大培养提取单克隆抗体。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用提取的_________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以用_________与分离出的病毒进行特异性检测。（5）与传统工程相比，生