吉非替尼对肺癌细胞a549 h1975放射敏感性的影响及机制分析-effect of gefitinib on radiosensitivity of lung cancer cell line a549 h 1975 and its mechanism analysis.docxVIP

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2018-05-20 发布于上海
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吉非替尼对肺癌细胞a549 h1975放射敏感性的影响及机制分析-effect of gefitinib on radiosensitivity of lung cancer cell line a549 h 1975 and its mechanism analysis

吉非替尼对肺癌细胞 A549 、 H1975 放射敏感性的影响及机制研究华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤中心硕士研究生曹喆导师陈元教授中文摘要目的：联合应用表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂-吉非替尼(Gefitinib)和放射线作用 EGFR 不同状态的 NSCLC 细胞 A549、H1975，观察该药对两种细胞放射敏感性、DSB 修复情况的影响及其 EGFR 是否均在 X 线照射后入核方法：1)克隆形成实验检测各组细胞α、β和 SF2 等值；2)免疫荧光显示放疗后不同时间点各组细胞核中磷酸化 γ-H2AX 的表达，分析 DSB 修复情况；3)免疫印记检测各组细胞不同时间点细胞核内外 EGFR 表达水平。结果：1) 加药组 A549 细胞 SF2 值为 0.355 低于对照组 0.4443；加药组 H1975 细胞和对照组 SF2 值分别为 0.3094 和 0.3207，无明显差异；2) A549 细胞加药组比对照组各时间点γ-H2AX 表达明显增高（T 表示加药组均数±标准差，t 表示对照组均数±标准差；T30min=22.33±2.30,t30min=14.18±2.61;T45min=15.95± 2.40,t45min=11.40±1.75;T60min=11.47±1.19,t60min=4.40±0.58; P0.05）；H1975细胞则无差异（ T30min=22.07 ± 0.56,t30min=21.59 ± 1.52;T45min=15.97 ± 0.90,t45min=15.63±0.93;T60min=11.39±0.39,t60min=10.83±1.29; P 0.05）；3)加药组 A549 细胞比未加药组胞浆 EGFR 表达明显增加（ T0min=18.1 ± 0.306,t0min=12.3 ± 0.557;T15min=18.2 ± 0.306,t15min=11.1 ± 0.379;T30min=16.2 ±0.551,t30min=7.37±0.451;T60min=15.5±0.265,t60min=4.53±0.379; P 0.05），胞核内 EGFR 显著减少（ T15min=0.51 ± 0.050,t15min=4.93 ± 0.321;T30min=1.03 ±0.115,t30min=5.20±0.361;T60min=0.81±0.025,t60min=5.70±0.458; P 0.05）；加药组 H1975 细胞和未加药组细胞照射后胞核内没有 EGFR 表达，且胞浆内 EGFR 表达水平两组细胞无明显差别（T0min=1.80±0.042,t0min=1.73±0.07;T15min=1.76±0.043,t15min=1.51±0.040;T30min=1.68±0.040,t30min=1.75±0.051;T60min=1.70± 0.021,t60min=1.65±0.036; P 0.05）。结论：吉非替尼能增加非小细胞肺癌 A549 放射敏感性，可能与吉非替尼抑制 A549 放射线损伤后的 DSB 修复,阻碍 EGFR 入核有关；而对 H1975 细胞没有影响，可能与其放射后 EGFR 不入核相关。关键词：非小细胞肺癌；表皮生长因子；酪氨酸激酶抑制剂；放疗增敏；吉非替尼Research on effection and mechanism of radiosensitivity of non-small cell lung cancer A549H1975 following gefitinib treatmentCandidate :Cao ZheSupervisor :Professor Chen YuanTongji Hospital Cancer Center, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology ，Wuhan, Hubei 430030ABSTRACTObjective: Two NSCLC cell lines with different expression of the epidermal growth factor receptor (EGFR) treated by combined gefitinib and irradiation, observe the difference between treated and control group of radiosensitivity, capacity for repairing