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巴州地区奶牛乳房炎病原菌分离鉴定及药敏试验-农学论文 巴州地区奶牛乳房炎病原菌分离鉴定及药敏试验 覃杰1，龙杰1，陆洪宾2，张伟1 （1.兵团第二师畜牧兽医工作站，新疆　库尔勒　841000；2. 兵团第二师三○团奶牛场） 摘要：从巴州地区规模牛场和散养户采集临床型乳房炎70份和隐性乳房炎96份奶样进行细菌分离鉴定，并对主要病原菌进行药敏试验。结果表明：从166份乳样中共分离出12种267株细菌，其中，主要病原菌为金黄色葡萄球菌，86株，检出率33.6%；大肠杆菌68株，检出率25.5%；停乳链球菌33株，检出率12.4%；无乳链球菌25株，检出率9.4%。临床型乳房炎大部分为混合感染（感染率61.4%），隐性乳房炎大部分为单独感染（感染率88.5%）。选择17种抗生素采用纸片琼脂扩散法对主要致病菌进行药敏试验，其中，头孢曲松钠、头孢哌酮舒巴坦、庆大小诺霉素极敏。该试验为本地区奶牛乳房炎的防治提供了理论依据。 关键词 ：巴州地区；奶牛乳房炎；分离鉴定；药敏试验 奶牛乳房炎是奶牛最普遍的疾病，是制约奶牛养殖业发展的最重要的疾病之一。该病可导致奶牛产奶量减少、牛奶品质降低，甚至导致病牛淘汰，造成严重的经济损失，其防治问题已日益为人们所关注。微生物感染是引起奶牛乳房炎的主要原因，而目前治疗奶牛乳房炎仍主要依靠抗生素，但抗生素的长期、大量使用，使得病原菌产生了严重的耐药性，这给临床上治疗奶牛乳房炎带来了巨大的困难。本试验对巴州地区奶牛乳房炎乳样进行了细菌分离鉴定和药敏试验，以筛选出有效的抗生素药物，提高乳房炎的治愈率，缩短本病疗程。 1　　　　材料与方法 1.1　　　　试验材料 1.1.1　　　　乳样 以巴州地区部分奶牛场及散养户为对象，选取临床型乳房炎70份和隐性乳房炎（LMT检测阳性）96份奶样。 1.1.2　　　　培养基及试剂 普通营养琼脂培养基、5%绵羊鲜血琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、药敏试纸片等按常规方法配置[1]。 1.1.3　　　　药物 青霉素、头孢曲松钠、氨苄西林、头孢噻呋钠、头孢哌酮舒巴坦、头孢唑啉钠、链霉素、庆大霉素、庆大小诺霉素、克林霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、林可霉素、土霉素、磺胺嘧啶钠和氟苯尼考。 1.2　　　　试验方法 1.2.1　　　　细菌分离培养鉴定[1] 将无菌采集的乳样3 000 r/min离心10 min后取沉淀物，接种于普通琼脂培养基、鲜血琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基后置于37 ℃恒温培养箱培养24 ~ 48 h，观察菌落生长情况及形态特征，挑取典型单个菌落涂片，革兰氏染色，镜检。根据菌落形态特征、溶血与否、染色特性及菌体形态初步判断细菌类型，参考各种细菌的生化特性，根据染色、镜检结果对分离的菌株有选择地进行生化试验。 1.2.2　　　　药敏试验 采用纸片琼脂扩散法[２]，将主要病原菌接种于营养肉汤（链球菌接种于绵羊血清肉汤），37 ℃培养18 h，所得菌液用麦氏比浊法进行比浊，用生理盐水稀释菌液使其含菌量为1亿个/mL。吸取菌液0.1 mL均匀涂抹于平板琼脂表面，贴上药敏纸片，每种西药做3个重复，置于 37 ℃温箱中培养18 ~ 24 h，测定抑菌圈直径，以3孔的平均值表示该种药的抑菌圈大小。结果判断标准[3]：抑菌环直径 ≥　20 mm为极度敏感，在15 ~ 19 mm之间为高度敏感，在11 ~ 15 mm之间为中度敏感，≤　10 mm为低敏，0 mm为耐药。 2　　　　结果与分析 2.1　　　　细菌分离鉴定结果 从166份乳样中共分离出12种267株细菌，其中：金黄色葡萄球菌86株，检出率32.2%；大肠杆菌68株，检出率25.5%；停乳链球菌 33株，检出率12.4%；无乳链球菌25株，检出率9.4%，其余为粪链球菌、化脓链球菌、真菌、绿脓杆菌和志贺杆菌。而有2份隐性乳房炎乳样则未检出细菌。从所采乳样分离得到的病原菌来看，临床型乳房炎主要是由2 ~ 3种病原菌混合感染引起，达到61.4%（43/70），隐性乳房炎多数为1种病原菌引起，占总数的88.5%（85/96），具体结果见表1。 2.2　　　　药敏试验结果 试验结果显示，对金黄色葡萄球菌极敏的药物为头孢曲松钠、头孢噻呋钠、头孢哌酮舒巴坦、庆大小诺霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、泰乐菌素、氟苯尼考；对大肠杆菌极敏的药物为头孢哌酮舒巴坦、头孢曲松钠、头孢噻呋钠、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大小诺霉素；对停乳链球菌极敏为头孢曲松钠、头孢哌酮舒巴坦、庆大小诺霉素和氟苯尼考；对无乳链球菌极敏的是头孢曲松钠、头孢哌酮舒巴坦、庆大小诺霉素和氟苯尼考。具体结果见表2。 3　　　　小结 细菌分离鉴定得出，金黄色葡萄球菌，