专题2-1 微生物的实验室培养（讲）-高二生物同步精品课堂（提升版）（选修1）（讲） Word版含解析.docVIP

选修1专题2课题1微生物的实验培养（讲） 一、基础知识 （一）培养基 【知识点讲解】 1.概念：讲解培养基概念：由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养基质。 2.种类 标准 培养基类型 配制特点 主要应用 固体培养基 加入琼脂较多 菌种分离、鉴定、计数 物理性质 半固体培养基 加入琼脂较少 菌种保存 液体培养基 不加入琼脂 工业生产、连续培养 3.成分 （1）基本成分 培养基成分 提供的主要营养物质 牛肉膏5g 碳源、磷酸盐和维生素 蛋白胨10g 氮源和维生素 NaCl 5g 无机盐 H2O定容至1000ml 氢元素、氮元素 （2）特殊成分和条件 培养基还需要满足不同微生物生长对PH、氧气、特殊营养物质的要求：如乳酸杆菌时需要添加维生素 ，霉菌需要将培养基pH调节为酸性 ，细菌时需要将pH调节为中性或微碱性 。 【方法点拨】培养基的配制原则 (1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。 (2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。 (3)pH要适宜：细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培养不同微生物所需pH不同。 下表为培养某种微生物的培养基配方，下列相关叙述错误的是成分NaN03 K2HP04 KC1 MgS04·7H20 FeS04 （CH20)H20 青霉素含量3g 1g 0.5g 0.5g 0.01g 30g 1L 0.1万单位A. 依物理性质划分，该培养基属于液体培养基B. 依用途划分，该培养基属于选择培养基C. 培养基中的唯一碳源是（CH20)，唯一氮源是NaN03D. 若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH20),再添加纤维素【答案】D【解析】分析表格信息可知，因配方中没有凝固剂琼脂，所以依物理性质划分，该培养基属于液体培养基，A项正确；因配方中有青霉素，所以依用途划分，该培养基属于选择培养基，B项正确；培养基中的唯一碳源是（CH20)，唯一氮源是NaN03，C项正确；若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH20)和青霉素，再添加纤维素，D项错误。下表为某培养基的配方，下列叙述正确的是(　　) 成分 蛋白胨 葡萄糖 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水 含量 10 g 10 g 2 g 0.4 g 0.065 g 1 000 mL A.从物理性质看该培养基属于液体培养基，从用途看该培养基属于选择培养基 B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖，属于氮源的物质是蛋白胨 C.该培养基缺少提供生长因子的物质 D.该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 答案B （二）无菌技术 【知识点讲解】 1.主要方面 （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品相接触。 2.消毒与灭菌的比较 项目 理化因素强度 消灭微生物数量 是否消灭芽孢和孢子 消毒 温和 部分 否 灭菌 强烈 全部 是 3.常用的消毒与灭菌的方法 （1）消毒方法： ①日常生活经常用到的是煮沸消毒法； ②对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法（作简要介绍）； ③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒。 ④实验操作者的双手使用酒精进行消毒； ⑤饮水水源用氯气进行消毒。 （2）灭菌方法： ①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法； ②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ； ③培养基、无菌水等使用 高压蒸汽灭菌法，所用器械是 高压蒸汽灭菌锅 。 ④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。 【典型例题】 关于消毒和灭菌的不正确理解是（ ）A. 灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、包括芽孢和孢子B. 消毒和灭菌实质上是相同的C. 常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌D. 常用消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法【答案】B 【变式训练】 微生物培养过程中，要十分重视无菌操作。现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作中错误的是(　　) ①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒 ④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 A.①③ B.②④ C.③⑤ D.④⑥ 答案D 二、实验操作 （一）制备牛肉膏蛋白胨培养基 1.计算：根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。