PTEN、p27kip1、VEGF在子宫内膜癌中的表达及意义.docVIP

PTEN、p27kip1、VEGF在子宫内膜癌中的表达及意义 【摘要】目的探讨抑癌基因PTEN、p27kip1、VEGF在子宫内膜癌中的表达、意义及三者之间的相关性。方法采用免疫组化SP法检测32例子宫内膜腺癌，13例子宫内膜不典型增生和10例正常子宫内膜石蜡切片中PTEN、p27kip1及VEGF的表达。结果子宫内膜腺癌组织与子宫内膜不典型增生、正常子宫内膜组织比较，PTEN、p27kip1阳性表达率明显降低，差异有非常显著性（χ2=11.09，χ2=9.466，　P0.01），VEGF表达率明显增加，差异有非常显著性（χ2=21.253，　P0.01）。PTEN表达与肿瘤分化、肌层浸润程度、淋巴结转移有关（P0.05），与临床分期无关（P0.05）。在子宫内膜腺癌组织中，PTEN与p27kip1表达呈正相关（r=0.744，P0.01），与VEGF表达呈负相关（r=－0.738，　P0.01）。结论PTEN、p27kip1的失表达与VEGF的过表达在子宫内膜腺癌的发生发展中起着一定的作用，PTEN与p27kip1、VEGF的异常表达密切相关，三者的联合检测有助于子宫内膜癌的早期诊断。 【关键词】 抑癌基因PTEN p27kip1基因 VEGF 子宫内膜癌 免疫组织化学 0 引言 癌基因的激活，抑癌基因的失活及细胞周期调控的失常与肿瘤的发生密切相关，PTEN又名MMACl、TEP1，是新近发现的肿瘤抑制基因，该基因的高度表达使肿瘤细胞生长受到抑制［1］，且PTEN是子宫内膜癌中突变率最高的基因［2］；p27kip1主要通过对CDKcyclinD、CDK2cyclinE的抑制阻滞细胞于G1期［3］。肿瘤的生长及转移有赖于血管的形成，目前发现血管内皮生长因子（VEGF）是诱导肿瘤血管生成作用较强和特异的调节因子［4］。因此本研究采用免疫组化对子宫内膜癌组织中PTEN、p27kip1蛋白及VEGF表达进行检测，旨在探讨PTEN、p27kip1、VEGF在子宫内膜癌中的表达及临床意义。 1 资料与方法 1.1 临床资料 选择兰州医学院第二附属医院1996～2002年手术切除的子宫内膜腺癌标本32份，选择同期子宫内膜不典型增生标本13份及正常子宫内膜标本10份，子宫内膜癌的细胞分级及分期均按FIGQ（1988）标准，G1　9例，G2　10例，G3　13例，I期11例，Ⅱ期12例，Ⅲ期9例，术前均未行放化疗，患者年龄39～71岁，平均55岁，所有HE切片均经病理专家复检确认。 1.2 试剂 鼠抗人PTEN、p27kip1、VEGF单克隆抗体、免疫组化SP试剂盒，DAB显色剂等均为福州迈新生物技术公司产品。 1.3 方法 石蜡包埋组织连续切片厚5mu;m，采用免疫组化SP染色，染色步骤严格按试剂盒要求进行。 1.4 结果判定 （1）PTEN判断标准：细胞浆内有橘黄色或棕黄色颗粒者为阳性细胞，计算10个高倍镜（times;400）视野下阳性细胞百分数，百分数le;20%为阴性，＞20%为阳性；（2）p27kip1定位于细胞核，阳性物质呈棕黄色或棕褐色颗粒状，在高倍镜下随机选取10个视野，计数1000个肿瘤细胞，对阳性细胞所占的百分比（0%=0，10%=1，11%～50%=2，51%～80%=3， 81%=4）及染色强度（无色=0，淡黄色=1，棕黄色=2，棕褐色=3）进行评分，以两者乘积3为阳性标准，（3）VEGF染色以细胞质和（或）胞膜中出现棕黄色颗粒为标准，以阳性细胞数目的多少进行分级0%～5%（-），5%～10%（±），10%～30%（+），30%～70%（++），大于70%（+++）［5］，见图1～4。 1.5 统计学处理 采用chi;2检验及计数资料的相关分析，所有数据以SPSS 8.0统计软件包进行统计学处理。 2 结果 2.1 PTEN的表达 10例正常子宫内膜组织中，9例阳性表达，6例（++），2例（+），1例（+++），阳性表达率为90%，13例子宫内膜不典型增生组中，6例阳性表达，3例（++），2例（+），1例（+++），阳性表达率为46.15%，32例子宫内膜腺癌组织中，9例阳性表达，5例（+），3例（+++），1例（++），阳性表达率为28.13%。从正常子宫内膜rarr;子宫内膜不典型增生rarr;子宫内膜腺癌，PTEN阳性表达率逐渐下降，差异有显著性意义（chi;2=11.904，　P0.01），子宫内膜不典型增生与正常子宫内膜相比较，差异有显著性意义（chi;2=4.790，　P0.05）,见表1。 表1PTEN、p27kip1、VEGF表达与子宫内膜组织学类型关系（略） a表示子宫内膜不典型增生与正常子宫内膜比较，b表示子宫内膜腺癌与子宫内膜不典型增生及正常子宫内膜组织