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大鼠胚胎神经干细胞异体移植对脊髓损伤的修复
大鼠胚胎神经干细胞异体移植对脊髓损伤的修复
【关键词】 胚胎神经干细胞;脊髓损伤;移植;轴突再生;大鼠
【摘要】 目的 观察胚胎神经干细胞(neural stem cells,NSCs)对成年大鼠脊髓损伤(spianl cord injury,SCI)的修复及对轴突再生的作用。 方法 制作20只大鼠SCI(T 7 )模型,随机分为实验组和对照组。伤后2d实验组移植经全离培养的Wistar大鼠NSCs;对照组只注入DMEM培养液。移植后第1、2、4、6周经电镜及免疫组化观察移植对脊髓轴突再生的影响。 结果 实验组NSCs与宿主融合较好,损伤区可见幼稚的呈束状排列的再生轴突;对照组轴突变性未见再生轴突。 结论 NSCs植入异体大鼠打击伤后的脊髓可存活,并产生髓鞘样物质促进宿主脊髓轴突再生。
【关键词】 胚胎神经干细胞;脊髓损伤;移植;轴突再生;大鼠
Transplantation of neural stem cells into injured spinal cord of adult rat
CHEN Jun.
Department ofLaboratory,Tianjin People Hospital,Tianjin300121
【Abstract】 Objective To observe the therapeutic effect of neural stem cells(NSCs)transplantation on spinal cord axonal regeneration.Methods Twenty rats were divided into two groups,10rats in each group.Two days after SCI models were made,NSCs suspension,purified from Wistar rats and transplanted into the injured spinal cords at T 7 levels,while the vehicle solution(DMEM)was injected in the control gruop.At1,2,4,6weeks after transplantation,the samples were procured and studied by electron microscope and immunohistochemical method.Results The morphology of translated NSCs was almost normal,and NSCs arrangement was good in the host.Axons could regrow into injured spinal cords.The axons regeneration was not found in the controls.Conclusion Transplantation of NSCs could integrate with the host and could promote the axons regeneration of host.
【Key words】 fetus neural stem cells;spinal cord injury;transplantation;axons regeneration;rats
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后再生能力受限主要是因为缺乏诱导、促进神经再生的微环境,而非损伤的轴突本身不具有再生能力。人们长期以来采用周围神经、神经胶质细胞和雪旺细胞移植等方法,在不同程度上促进脊髓神经轴突再生。NSCs在促进脊髓轴突再生方面是近年来继雪旺细胞研究之后的又一热点[1] 。本研究是建立一个成年大鼠脊髓(T 7 )损伤模型,于损伤处植入NSCs并观察其对轴突再生的促进作用。
1 材料与方法
1.1 动物及主要试剂 (1)孕14d雌性Wistar大鼠3只;体重230~250g成年Wistar大鼠20只。(2)细胞培养试剂及抗体DMEM.F12和B27添加剂;巢蛋白单克隆抗体(Nestin);胶质纤维酸性蛋白抗体(GFAP);神经元特异性抗体(NSE)等。
1.2 脊髓损伤模型的建立 Wistar大鼠20只乙醚吸入麻醉后俯卧位固定于手术台上,背侧正中切口,暴露T 7 椎板并切除,显露肌膜,按Allen打击法将打击头(直径2mm,重10g)置于硬膜上4cm处,使重物自然下落,打击量为40g-cm。迅速移开打击头,止血后逐层关闭伤口,复苏后饲养,每8小时挤尿1次,随机分为对照组和实
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