激活突变shp-2酪氨酸磷酸酶促进砷导致的mefs恶性转化和裸鼠成瘤风险-activating mutant shp - 2 tyrosine phosphatase promotes arsenic-induced mefs malignant transformation and nude mice tumorigenesis risk..docx

中英文缩写一览表英文缩写英文全称中文全称SHP-2Srchomology2domaintyrosinephosphatasesSHP-2酪氨酸磷酸酶As2O3Arsenictrioxide三氧化二砷C3GCyanidin-3-Glucoside矢车菊-3-葡萄糖苷DMEMDulbeeeo’5ModifiedEagle’5Medium达尔伯克(氏)改良伊格尔(氏)培养基FBSFetalbovineserum胎牛血清AKTSerine/ThreonineKinase丝氨酸/苏氨酸激酶JNKc-JunN-terc-JunN-terminalkinasec-JunN端激酶ERKExtracellularsignal-regulatedkinase胞外信号调节激酶P38P38mitogen-activatedproteinkinaseP38丝裂原活化蛋白激酶MAPKMitogen-activatedproteinkinase有丝分裂激活蛋白酶NF-κBTranscriptionfactornuclearfactorκB核转录因子-??BPI3KPhosphatidylinositol3-kinase磷脂酰肌醇-3激酶DMSODimethylSulfoxide二甲基亚枫BSABovineserumalbumin牛血清白蛋白MTT3-[4，5-dimehyl-2-thiazolyl]-2，5-diPhenyl-2H-tetrazoliumbromide噻唑蓝PIpropidiumiodide碘化丙啶ECLEnhancedchemiluminescene化学发光自显影PVDFPolyvinylidenedifluoride(membrance)聚偏(二)氟乙烯（膜）PAGEPolyacyrlamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳ROSReactiveoxygenspecies活性氧1激活突变SHP-2酪氨酸磷酸酶促进砷导致的MEFs恶性转化和裸鼠成瘤风险摘要【背景及目的】恶性肿瘤是威胁人类健康的重要疾病之一，近年来呈现发病率升高及发病早龄化的趋势。多项研究提示，肿瘤的发生(tumorigenicity)受到环境因素(environmentalfators)和遗传因素(geneticfactors)共同调控，并且是一个多因素，复杂的长期过程。因此对其内外因素在肿瘤发生过程中作用机制的研究显得尤为重要。SHP-2(Srchomology2-containingproteintyrosinephosphatase,SHP-2)是一种广泛存在与哺乳动物多种组织细胞中的非受体型酪氨酸磷酸酶，参与细胞的存活、迁移、粘附、细胞骨架形成等生理过程。研究表明，其突变体在努南综合征(Noonansyndrome,伴髓系异常增殖病)，髓系增殖病，幼年型粒单细胞白血病(Juvenilemyelomonocyticleukemia,JMML)及其他白血病和一些实体瘤的发生发展中发挥重要作用。本课题组一直致力于研究SHP-2蛋白(由PTPN11编码)在白血病及实体瘤发生发展中的作用。并且我们发现SHP-2激活突变(gain-of-functionmutation,GOFmutation)可能参与环境因素导致的小鼠白血病、实体瘤等恶性疾病的发生。D61G/D61Y的激活是SHP-2最常见的激活突变体，Neel实验室通过计算机模拟技术发现D61G突变使SHP-2活性发生一定程度增强，并且他们建立了此SHP-2D61G/+基因敲入小鼠模型，发现小鼠出现努南综合征的表征、并伴随髓系异常增殖，出现脾脏肿大等症状，但是却没有白血病等恶性疾病的发生。我们设想可能因为此小鼠饲养在SPF(Specificpathogenfree)级环境中，没有接触任何外界环境污染物，所以才没有发生白血病等恶性疾病。于是我们使用MNU(methylnitrosourea)处理此模型小鼠，流式检测结果显示小鼠白血病发病率明显升高。但是在日常生活中人们不可能接触到如此高剂量、高纯度的DNA损伤剂。查阅相关文献及流行病学资料，我们选用一种类金属污染物As2O3(Arsenictrioxide)，来处理MEFs(SHP-2+/+)和MEFs(SHP-2D61G/+)细胞，以观察在As2O3导致MEFs细胞恶性转化及裸鼠体内实体瘤形成的过程中，SHP-2激活突变扮演怎样的角色。砷是国际癌症研究中心(InternationalAgencyforResearchonCancer,IARC)确认的化学致癌物。有研究表明砷及其代谢产物，可以诱导产生ROS(Reactiveoxygenspecies)，引起氧化应激，进而通过导致DNA损伤、异常活化多种信号通路等机制，来促进肿瘤的发生。为了进一步探讨