选修3现在生物科技专题章末归纳整合.ppt

易错易 误辨析 菜 单 隐 藏 山东金太阳书业有限公司 2013 · 新课标高考总复习 · 配浙科生物 [含一、二、三、四章] 一、限制性核酸内切酶和DNA连接酶作用解析 1．限制酶 限制酶具有专一性，表现在两个方面 (1)识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列。 (2)切割特定序列中的特定位点。使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。产生的DNA片段末端通常有两种形式——粘性末端和平末端。 ①粘性末端：当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是粘性末端。 如：EcoR Ⅰ识别GAATTC序列，将G与A两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。如下图所示： ②平末端：当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的则是平末端。 如：Sma Ⅰ识别CCCGGG序列，将C与G两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。如下图所示： [特别提醒]　一种限制酶只能专一识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割后只能产生一种末端。由一种限制酶切出的末端相同，并能被特定的DNA连接酶连接起来。 2．DNA连接酶 (1)DNA连接酶的分类 根据酶的来源不同，可以将这些酶分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E·coli DNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4 DNA连接酶。 (2)DNA连接酶的作用 DNA连接酶的作用是将限制酶切下来的DNA片段拼接成新的DNA分子。两类DNA连接酶都是将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。如图所示： (3)两类酶在性质上的差别 E·coli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的粘性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间进行连接。而T4 DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的粘性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率比较低。 3．几种易混淆酶的比较 名称 功　能 限制酶 特异性地切断DNA链中的磷酸二酯键 DNA 连接酶 连接DNA片段之间的磷酸二酯键，不需要模板 DNA 聚合酶 连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，需要一条DNA链作模板 RNA 聚合酶 连接RNA片段与单个核糖核苷酸之间的磷酸二酯键，也需要模板 逆转录酶 作用于磷酸二酯键 DNA 解旋酶 使碱基对之间的氢键断裂 DNA 水解酶 使DNA分子所有磷酸二酯键断裂 二、基因、基因文库和目的基因的概念比较 1．基因：具有遗传效应的DNA片段，是控制生物性状的遗传物质的结构和功能单位，基因的脱氧核苷酸序列代表遗传信息。 2．基因文库 (1)含义：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中通过克隆而储存，含有这种生物的不同基因的受体菌群体便构成了基因文库。 (2)分类 ①基因组文库：含有一种生物的所有基因的基因文库。 ②部分基因文库：含有一种生物的部分基因的基因文库，如cDNA文库。 (3)建立基因文库的目的：为保存或获得大量的目的基因作准备。 3．目的基因：基因工程操作中需要的外源基因，它是编码某种蛋白质的结构基因，如生物的抗逆性基因、抗虫基因等。 1．下图为转基因抗病香蕉的培育过程流程图，其中质粒上的Pst Ⅰ、Sma Ⅰ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请据图回答下列问题： (1)图中①②表示组织培养过程中香蕉组织细胞的________。利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组 织细胞培育成植株，证明了香蕉组织细胞具有________。 (2)形成重组质粒A时，应选用的限制酶是________，对________进行切割。 (3)一个质粒被限制酶EcoR Ⅰ、Pst Ⅰ、Sma Ⅰ同时切割后可得到________个DNA片段，________个粘性末端。 (4)培养基中的氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使重组质粒A中含有________基因。 解析：(1)图中①②表示组织培养过程中香蕉组织细胞的脱分化和再分化的过程。把转入了抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株的过程，证明了香蕉组织细胞具有全能性。(2)分析题图，在抗病基因的两端有两个限制酶切点，即Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ限制酶切点，故可以用它们切割获得目的基因。同样用这样的限制酶切割质粒，以获得相同的粘性末端。(3)一个质粒被限制酶EcoR Ⅰ、Pst Ⅰ、Sma Ⅰ同时切割后可得3个DNA片段，共有4个粘性末端。(4)由于氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，若在这样的培养基中培养香蕉时，必须让香蕉细胞具有抗氨苄青霉素的能力。 答案：(1)脱分化和再分化　全能性 (2)Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ　含抗病基因的DNA和质粒 (3)3　4 (4)抗氨苄青