ivfet周期中不同原核数受精卵的发育潜能及其囊胚染色体组成的实验研究-experimental study on developmental potential and blastocyst chromosome composition of fertilized eggs with different pronucleus numbers in ivf et cycle.docx

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者： 日期： 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者： 日期： 年 月 日 摘 摘 要 IVF-ET 周期中不同原核数受精卵的发育潜能及其囊 胚染色体组成的实验研究 研究生 张亚楠 导 师 张翠莲 教授 郑州大学人民医院 生殖医学研究所 中国 郑州 450003 摘 要 背景与目的 在人类体外授精-胚胎移植（in vitro fertilization embryo transfer，IVF-ET）助 孕过程中，国内外的大多数生殖中心一般于授精后 16~18 h 对胚胎行原核数目的 观察和评价。胚胎学家们通过对大量工作进行总结后普遍认为，正常受精的胚 胎在授精后的 16~18 h 可观察到明确存在的 2 个原核（pronucleus，PN）及 2 个 极体（polar body，PB）。随后再结合胚胎的卵裂及整体发育情况，将那些形态 学评分较高的卵裂期胚胎或囊胚挑选出来，进行移植或者冷冻。而在实际的胚 胎实验室工作中，往往会出现一些异常受精胚胎，其中 1PN 胚胎和 0PN(2PB) 胚胎作为异常受精的胚胎，与多原核胚胎和发育停滞的 2PN 胚胎一起作为废弃 胚胎销毁。实际上，有一定比例的 1PN 及 0PN(2PB)胚胎可能是因为错过了最适 宜的观察时间导致。如果把这两类胚胎全部销毁，将在一定程度上造成卵母细 胞及胚胎资源的浪费。已有不少报道指出，有相当一部分的不孕症患者移植 1PN 胚胎及 0PN(2PB)胚胎后生育出健康的子代。 在 IVF-ET 助孕过程中，挑选出健康的胚胎进行移植是成功妊娠的关键所在。 近年来，随着遗传学诊断方法的不断发展，植入前胚胎的染色体诊断技术得到 了长足的发展，最主要的是胚胎植入前遗传学诊断 （preimplantation genetic diagnosis，PGD）及胚胎植入前遗传学筛查（preimplantation genetic screening， PGS）。目前，用于 PGD 及 PGS 的实验技术主要有荧光原位杂交技术（fluorescence I in situ hybridization，FISH）、微阵列比较基因组杂交分析（array-comparative genome hybridization，array-CGH）、单核苷酸多态微阵列技术（single nucleotide polymorphism microarray，SNP-microarray）和第二代测序法（next generation sequencing，NGS）。其中 array-CGH 具有高效率、高通量、高精度、低消耗等 特点，已在 PGS 临床工作中得到了广泛的应用。 本研究的开展经郑州大学人民医院医学伦理委员会批准通过，研究进行过 程中做到充分尊重患者的知情权和自主选择权。研究通过对 787 个 IVF 周期和 298 个 ICSI 周期患者的胚胎培养情况及基本资料进行分析，探讨 1PN 胚胎及 0PN(2PB)胚胎这类“异常受精”胚胎的发育潜能及与形成这两类胚胎的可能影 响因素。并观察研究中 IVF 周期患者胚胎的原核情况及卵裂情况，并将其体外 培养至囊胚阶段（最多培养至第 6 日），观察其囊胚形成情况，检测 0PN(2PB)、 1PN 及 2PN 囊胚的染色体组成，以探寻选择高发育潜能的 1PN 及 0PN(2PB) 胚 胎的方法。 材料和方法 本研究选取了郑州大学人民医院生殖医学研究所自 2014 年 7 月至 2014 年 10 月行 IVF-ET 助孕的患者（IVF 周期数=787；ICSI 周期数=298），经患者知 情同意后，观察并记录其胚胎继续培养情况，探讨 1PN 及 0PN(2PB) 胚胎这类 “异常受精”胚胎的发育潜能，同时分析这些患者的临床资料，研究与 1PN 及 0PN(2PB) 胚胎形