jakstat信号通路在痛风性关节炎发病中的作用及铁锁痛风汤对其防治的研究-the role of jak stat signaling pathway in the pathogenesis of gouty arthritis and the study of tiesuo gouty decoction on its prevention and treatment.docxVIP

JAK-STAT信号通路在痛风性关节炎发病中的作用及铁锁痛风汤对其防治的研究专业：肾病风湿研究生：陈曾凤导师：李龙教授摘要目的：1.探讨酪氨酸激酶-信号传导及转录激活因子（JAK-STAT）信号通路与痛风性关节炎发病机制的关系2.采用贵州苗药方剂（铁锁痛风汤），明确其对痛风性关节炎的治疗作用，筛选对痛风性关节炎治疗的有效方剂。方法：取50只SD雄性大鼠，将其随机分为5个组，10只为1组，分别设定为正常组(K)，模型组（M），秋水仙碱组（Q），低剂量苗药治疗组（D），高剂量苗药治疗组（G）。除正常组外，各组均采用尿酸钠（MSU）溶液（浓度为20mg/ml），每只50ul，注射至大鼠右后肢踝关节腔内，以对侧鼓起为标准，制造急性痛风性关节炎模型，正常组取等量生理盐水。分别于造模前1小时，以及造模后1、4、12、24、48小时测定各组大鼠踝关节周径，计算关节肿胀指数。于造模之前3天开始灌胃，模型组和正常组给予3ml生理盐水，其余各组相应给予低剂量苗药、高剂量苗药、秋水仙碱，连续灌胃5天(每天2次)，第5天第二次灌胃2小时后，处死大鼠，取其右侧后肢踝关节组织，行HE染色观察各组大鼠右后支踝关节软骨的病理变化，以及行免疫组化法和Real-timePCR检测JAK2的表达。结果：1.模型组大鼠关节的肿胀指数要明显高于其他各组。HE染色可见模型组关节软骨和周围软组织炎症细胞浸润程度及肿胀程度均明显高于其他组。药物组（包括低剂量苗药组、高剂量苗药组及秋水仙碱组）炎症反应较模型组明显改善。2.Real-timePCR结果表明：模型组JAK2mRNA表达量较正常组高,高剂量苗药组与秋水仙碱组同模型组比较，其表达是明显下调的（P0.05）。高剂量苗药组、秋水仙碱组同低剂量苗药组比较，表达量减少，具有统计学意义(P0.05)。3.免疫组化结果:模型组JAK2阳性指标数高于对照组。药物组（包括高剂量苗药组、低剂量苗药组、秋水仙碱组、）的JAK2阳性标记指数均明显低于模型组（P0.05），高剂量苗药组与秋水仙碱组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论：1.JAK2参与了痛风性关节炎的发病机制，可能与JAK2-STAT3信号通路的激活有关，可进一步行STAT3在痛风性关节炎中的表达变化明确！2.铁锁痛风汤可以减轻痛风性关节炎模型中，大鼠的关节肿胀程度，以及关节软骨、软组织的炎症程度，可以下调JAK-STAT炎症信号通路中的JAK2表达量，说明本方剂可以抑制模型大鼠急性痛风关节炎症的发作，且可能与下调JAK2的表达有关。关键词：JAK2；秋水仙碱；急性痛风性关节炎；铁锁痛风汤英文缩略语表英文缩写英文全文中文译名JAKJanusKinase酪氨酸激酶STATSignaltransducersandactivatorsoftranscriptionRT-qPCRReal-timefluorescencequantitativepolymerasechainreaction信号传导及转录激活因子实时荧光定量聚合酶链反应IL-14interleukin-1白细胞介素-14PAFPlatelet-ActivatingFactor血小板活化因子TNFtumornecrosisfactor肿瘤坏死因子HEhematoxylin-eosinstaining苏木精—伊红染色法IHCImmunohistochemistry免疫组化SDSpragueDawleySD大鼠1前言痛风是因嘌呤代谢紊乱及尿酸排泄减少，尿酸钠结晶沉着于关节及其周围结缔组织，引起组织病理变化及炎症反应的一种代谢性疾病，局部表现为红、肿、热、痛，随着病情发展，会引起痛风性肾炎，尿酸肾结石，以及性功能减退，高血压等多种并发症。人体内的尿酸来源包括内源性及外源性，内源性占80%，是高尿酸血症的重要组成部分，指通过体内氨基酸、磷酸核糖及其他小分子化合物的尿酸及核酸分解代谢产生的尿酸。从食物中核苷酸分解而来的尿酸称为外源性尿酸，约占体内总尿酸的20%。大多数哺乳动物和禽类体内有尿酸酶，可将其分解为尿素囊，但人体缺乏尿酸酶，因此人体内的尿酸即为嘌呤代谢的终末产物，通过肾脏及肠道直接排出体外。酪氨酸激酶-信号传导及转录激活因子（JAK-STAT）通路是一条将信号从细胞膜直接传递到细胞核，激活靶基因转录的信号转导通路，其参与了细胞增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多的生理病理过程[1]。主要是细胞因子与相应的受体结合后引起受体分子的二聚化，与受体偶联的JAK激酶相互接近，并通过交互的酪氨酸磷酸化作用而活化。JAK激活后催化受体上的酪氨酸残基发生酸化修饰，招募含有SH2、SH3结构域的STAT蛋白，最后，JAK催化STAT蛋白发生磷酸化修饰，并使其以二聚体的形式进入细胞核内与靶基因结合，调控基因的转录[2-5]。近年来已有相关