《病原微生物学精品教学》第11章 弧菌属.pptVIP

目前，全世界每年有超过30万人发病，5000人因此死亡，霍乱已成为当今世界最重要的公共卫生问题之一。对霍乱的预防主要依靠：处理水源和污物，保证安全的公共卫生设施；注射霍乱疫苗，降低发病率，减轻症状和降低死亡率。 O139群霍乱弧菌——1992年大流行中发现 目前世界卫生组织规定，霍乱病原菌包括O1群霍乱弧菌与O139群霍乱弧菌 （二）培养特性 耐碱不耐酸 碱性蛋白胨水(pH8.8～9.2) TCBS培养基（黄色菌落） El Tor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌生化反应有所不同 El Tor型V－P试验为阳性，能产生强烈的溶血素，溶解羊红细胞，在血平板上生长的菌落周围出现明显的透明溶血环， 古典型试验V－P试验为阴性，不溶解羊红细胞。 个别EL Tor型霍乱弧菌株亦不溶血。 致病机理 霍乱（Cholera） 传染源：患者及带菌者 易感者:人类(唯一) 传染途径:粪-口(污染的水源) （Cholera意思为“来自污水的恶魔”） 霍乱患儿 “干性霍乱”（暴发型霍乱） 起病急骤 尚未出现腹泻和呕吐症状 迅速出现中毒性休克 死亡率很高 霍乱弧菌检验程序 微生物学检查结果 标本：呕吐物、米泔水样粪便 直接镜检 分离培养 PCR G-弧菌 碱性蛋白胨水 肠毒素 运动活泼 凝集反应 标本 病人粪便，肛拭 流行病学调查还包括水样 粪便标本：Cary-Blair保存液 肠道病原菌：甘油盐水缓冲保存液 直接镜检 革兰染色阴性 弧菌 悬滴法观察细菌呈“鱼群穿梭样”运动有助于诊断 分离培养 接种碱性蛋白胨水增菌 目前常用的选择培养基为TCBS（硫代硫酸钠柠檬酸胆盐蔗糖培养基 ），霍乱弧菌因分解蔗糖呈黄色菌落 挑选可疑菌落进行生化反应 血清学反应----玻片凝集反应 霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上的菌落特征（18-24h） 霍乱弧菌血清学反应（凝集反应） 血清学检查 试管凝集试验 杀弧菌抗体检测 诊断 （一）诊断标准　具有下列之一者，可诊断为霍乱。 １.有腹泻症状，粪便培养霍乱弧菌阳性。 ２.霍乱流行期间，在疫区内有典型的霍乱腹泻的呕吐的症状，迅速出现严重脱水，循环衰竭和肌肉痉挛者。虽然粪便未培养出霍乱弧菌，但并无其他原因可查者。如有条件可作双份血清凝集试验，滴度４倍以上者可诊断。 ３.疫源检索中发现粪便培养阳性前５天内有腹泻症状者，可诊断为轻型霍乱。 诊断 （二）疑似诊断 １.具有典型霍乱症状的首发病例，病原学检查尚未肯定前。 ２.霍乱流行期间与霍乱患者有明显接触史，并发生泻吐症状，而无其他原因可查者。 （1） 第Ⅳ组霍乱噬菌体裂解试验： 第Ⅳ组霍乱噬菌体常规稀释液（106/ml）一般仅裂 解古典型，而不裂解El Tor型。 （2）多粘菌素B敏感试验： 取被检菌2-3h肉汤培养物点种到含药营养琼脂平板上（多粘菌素B50U／ml）,37℃培养24h，El Tor生物型生长，而古典型敏感。 ⒊ 鸡红细胞凝集试验：在玻片上滴加生理盐水一滴，取被检菌18-24h培养物少许在盐水中制成浓厚菌悬液，然后加一滴2.5％鸡红细胞悬液，充分混匀， 霍乱疫苗接种已有100多年的历史，曾用的最为广泛的是非经肠道免疫制剂—灭活的霍乱弧菌菌体苗，采用肌肉注射，经60年代霍乱流行区控制试验表明，效果不佳，副作用大 现今研制的rbs或rbs-wc口服疫苗，副作用小，免疫效果好，在孟加拉现场试验表明对霍乱的保护作用至少可持续3年，特别有意义的是在霍乱流行区，危及生命的严重病人可减少50%，因此被认为是当今最好的疫苗，且能对肠毒性腹泻、旅行者腹泻有保护作用，是已被who推荐应用的疫苗 鉴定试验（p188) 嗜盐性试验 生化试验 显微镜检 患者血清凝集试验 毒性试验 耐热溶血素检验方法（神奈川现象）：接种在我萋兔血琼脂平板上） 本 章 复 习 要 点 概念：O139群霍乱弧菌(查资料) 简答题 直接镜检对霍乱诊断的意义？ 为何霍乱病人出现剧烈米泔水样腹泻？ 某地区发现首例疑似霍乱患者，结合你的专业谈谈应需开展哪些工作？ 食物中毒 该菌经烹饪不当的海产品或盐腌制品 传播。 潜伏期5～72小时，可从自限性腹泻 至中度霍乱样病症。 二、致病性与免疫性 （神奈川现象） Adenylate cyclase 腺苷酸环化酶 choleragen霍乱原也叫霍乱肠毒素 CT Diarrhea 腹泻 cholera：[k?l?r?] 【医】霍乱[U] 恒河Sacred [‘seikr