可溶性mog35-soluble mog 35.docxVIP

英文缩略词表APC: antigen presenting cell抗原提呈细胞CTLA-4: cytotoxic T lymphocyte activation细胞毒性 T 细胞活化抗原-4 antigen-4CFSE: 5-carboxyfluorescein acetate succinimidy15-二醋酸羧基荧光素琥珀酸ester单胞菌酯CFA: Complete Freund’s adjuvant完全弗氏佐剂EAE: experimental autoimmune encephalomyelitis实验性自身反应性脑脊髓炎ELISA: enzyme linked immunosorbent assay酶联免疫吸附试验FoxP3: Forkhead/winged helix transcription factor叉状头/翅膀状螺旋转录因子HRP: Horseradish peroxidasey辣根过氧化物酶IL-17: interlukine白介素 17IFN-γ: interferon-γγ 干扰素IPTG: isopropy-β-D-thiogalactoside异丙基-β-D-硫代半乳糖苷mTGF-β: membrane transforming growth factor-β 膜型转化生长因子 βMHC: major histocompatibility complex主要组织相容性复合体MBP: myelin basic protein碱性髓鞘蛋白MOG: myelin oligodendrocyte glycoprotein髓鞘少突胶质细胞糖蛋白MOG35-55/I-Ab dimer加载 MOG35-55 肽的 I-Ab 二 聚体MS: multiple sclerosis多发性硬化OPD: ortho-phenylenediamine dihydrochloride邻苯二胺OD: optical density吸光度pMHC: peptide/MHC complex抗原肽/MHC 复合物PI: proliferation index增殖指数PMA: phorbol myristate acetate乙酰肉豆蔻佛波酯PLP: proteolipid protein髓鞘蛋白脂蛋白PTX: pertussis toxin百日咳毒素SDS: sodium dodecyl sulfate-十二烷基硫酸钠聚丙烯酰Polyacrylamide gel electrophoresis胺凝胶电泳SPA: staphylococcal protein A葡萄球菌蛋白 ATCR: T cell receptorT 细胞抗原识别受体Th1: helper T cell type 1辅助性 T 细胞 1 型Th17: helper T cell type 17辅助性 T 细胞 17 型Treg: regulatory T cell调节性 T 细胞可溶性 MOG35-55/I-Ab 二聚体治疗 MOG35-55 诱发的小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎博士研究生：龚业莉 指导教师：吴雄文教授中文摘要实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis， EAE）是人类多发性硬化（multiple sclerosis，MS）的动物模型，是典型的 T 细 胞应答诱导的自身免疫性疾病。在抗原肽 MOG35-55 诱发的 C57BL/6 小鼠 EAE 模型中，T 细胞识别表位十分明确，可诱导相应的自身反应性 CD4+ T 细胞应 答，造成组织损伤。本研究中，我们选择 MOG35-55 特异性 CD4+ T 细胞作为干 预对象，构建并制备出可与上述 CD4+ T 细胞特异性结合的可溶性 pMHC 二聚体（MOG35-55/I-Ab 二聚体），并将其应用于 EAE 小鼠模型。体外与体内的实验 结果表明，针对 MOG35-55 特异性 CD4+ T 细胞的可溶性 MOG35-55/I-Ab 二聚体 可以抑制抗原特异性自身反应性 T 细胞的增殖，抑制介导 EAE 的 Th1 与 Th17 细胞的扩增，从而阻断小鼠 EAE 的发生。其可能的机制为下调抗原特异性 T 细 胞 CD3-TCR 的表达及上调抑制性细胞因子 mTGF-β 与 IL-10。总之，本研究证 明可溶性 pMHC 二聚体对于单肽诱发的小鼠 EAE 模型可以起到有效的治疗作 用，为治疗自身免疫性疾病提供新的思路。论文共包括三个部分，其主要内容与结果如下：一、可溶性 I-Ab/Fc 的构建、表达与鉴定在本室之前构建的共价连接 MOG35-55 肽段的 I-Ab/Fc 二聚体的基础上，通 过重叠 PCR 技术获得不含 MOG35-55