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补肾方对大鼠实验性脂肪肝性激素水平影响 　　近年来由于生活水平提高、饮食结构改变及预防保健措施相对滞后，我国脂肪肝发病率逐年上升，中药复方在降低血脂、恢复肝功能、回缩肝脏方面均有显著疗效，且少有副作用，越来越受到众多医患的重视。补肾方是上海市名中医王灵台教授积多年临床经验探索出的治疗慢性病毒性肝炎的经验方，在临床实践中逐渐发现脂肪肝的发病与慢性病毒性肝炎某一阶段的病机有一定的相似性。根据异病同治、治病求本的中医治疗原则，笔者将补肾方用于大鼠脂肪肝实验性治疗及机理探讨，现报道如下。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1．1 实验动物清洁级雄性SD大鼠70只，体重（200±10）g。由上海中医药大学动物实验中心自中科院购进。 　　1．2 实验用药补肾方煎剂：由巴戟天、甜苁蓉、枸杞子、生地、苦参、田三七、青皮等组成，由上海中医药大学附属曙光医院制剂中心制备成浓度为1．5625g／mL的煎剂。东宝肝泰片：通化东宝药业股份有限公司生产，批号：021219。胆固醇：上海伯奥生物技术有限公司生产，批号：030208。 　　1．3 实验方法 　　普通饲料适应喂养1周后，随机分为2组。正常对照组：10只，继续普通饲料喂养。造模组：60只，予高脂饲料(普通饲料加10％猪油、2％胆固醇)喂养，12周后将造模组随机分为6组。模型对照组、中药组、西药组：继续高脂饲料喂养；饮食控制组、中药加饮食控制组、西药加饮食控制组：停用高脂饲料，改用普通饲料喂养。其中正常对照组、模型对照组、饮食控制组予生理盐水灌胃；西药组、西药加饮食控制组：予含东宝肝泰片0.28g/（kg#8226;d）的同容积水溶液灌胃；中药组、中药加饮食控制组：予含生药3.35g/（kg#8226;d）的同容积补肾方煎剂灌胃。实验动物自由进食、饮水。4周后，禁食12h，乌拉坦麻醉，腹主动脉取血，分离血清，-70℃保存待测各指标。称肝湿重，取右叶肝组织1g，4℃ 下制成10％肝细胞匀浆，高速离心(4000r/min，15min)后取上清液，-70℃保存待测肝组织脂质。取左叶肝组织两块，分别作甲醛固定和戊二醛固定。 　　1．4 观察指标 　　1．4．1 一般指标观察 体重、肝大体标本观察，肝湿重。 　　1．4．2 生化指标检测 血清ALT、AST、TC、TG、HDL、LDL及肝组织TC、TG、HDL、LDL指标，用美国雅培公司全自动生化分析仪检测，试剂采用Beckman公司，曙光医院检验科协助完成。 　　1．4．3 睾酮 雌二醇 　　试剂购自北京原子高科和技术应用公司，复旦大学附属儿科医院放免实验室协助完成。 　　1．4．4 组织病理学检查 （1）H-E染色：甲醛固定，常规洗涤、脱水、石蜡包埋，切片、H-E染色。肝细胞脂肪变性程度参考文献，根据低倍镜下肝小叶内含脂滴细胞数／总细胞数的比值分别为0、[1]。（2）超微结构观察：戊二醛固定，脱水、包埋，超薄切片，电子染色，电镜观察。病理切片的制作观察均由上海中医药大学病理教研室协助完成。 　　1．5 统计学处理 　　计量资料用均数±标准差表示，各组均数的比较用方差分析。 　　 　　2 结 果 　　 　　2．1 一般情况 　　实验中各组大鼠体重增长基本一致，进食、活动、灵敏度无明显差别。在实验的第13～16周，模型组、西药组、中药组、饮食控制组及饮食西药组各有1例动物死亡，尸解多为肺淤血改变，1例为气胸，考虑死因均为灌胃损伤窒息所致。 　　2．2 各组大鼠体重 肝指数 脾湿重/体重比较 　　 　　模型组大鼠体重与正常组相比有所增加，有显著性差异(P0.05)；西药组、西药加饮食控制组、中药组、中药加饮食控制组与模型组相比，雌二醇均有不同程度下降，但无显著差异（P0.05）。 　　 　　2．7 实验动物病理及组织学改变 　　2．7．1 肝脏大体形态观察 正常组：肝脏呈红褐色，质地柔软，富有弹性。 模型组：肝脏体积增大，颜色呈黄色或黄灰色，质地松脆，弹性较差。中药加饮食控制组：肝脏体积较模型组稍小，较正常组仍大，颜色呈浅淡的红褐色，弹性柔韧性接近正常组。西药组、西药加饮食控制组、中药组：肝脏体积接近模型组，颜色为浅淡的红褐色多见红黄相间的脂肪浸润，质地较正常组织软，弹性柔韧性较正常组略差。饮食控制组：接近模型组。 　　2．7．2 光镜H-E染色观察 见表5。正常组：光镜下肝小叶结构完整，肝索以中央静脉为中心呈放射状排列，肝细胞呈多面形，核大而圆。模型组：可见弥漫性肝细胞脂肪变，主要为小泡性脂肪变性，部分为大泡性脂肪变性，同时肝小叶内和汇管区可见单核细胞为主的炎细胞浸润，以小叶内炎症为主，部分肝小叶内坏死灶融合成片，有2例出现碎屑样坏死，2例出现桥接坏死，NASH模型复制率为100％。中药加饮食控制组