第三章真核细胞周期调控的分子机制唐旭东级.pptVIP

14-3-3σ与肿瘤 14-3-3σ受P53诱导，参与DNA损伤的调节，在P53非依赖的调节机制中可能起作用 功能丧失促进恶性转化 P27与肿瘤 表达下降与癌症的发生和低存活有关，是癌症进展的标志 表达下降可能与泛素介导的降解增加有关 受c-Myc的调节 第64页/共65页 第65页/共65页 一、INK4 家族的CKI （二） P15 诱导剂：转化生长因子（TGF-β） 意义： 甲基化使P15启动子沉默在血液恶性病变中起重要作用 P15的异常甲基化对估计预后具有意义 ※P15和P16都具有抑制端粒酶活性和抑制细胞生长的作用（具有肿瘤抑制作用） 第32页/共65页 二、 CIP / KIP 家族的CKI 包括:： P21 (CIP1/WAF1/SDI)、P27 (KIP1)、P57(kip2）等 共同结构：N端CDK抑制性功能域 功能： 抑制CDK2-细胞周期蛋白A和CDK2-细胞周期蛋白E的激酶活性。 过多表达引起G1期细胞周期蛋白停滞。 P21和P27是CDK4的激活因子。 第33页/共65页 （一）P21 结构特点：启动子上有P53结合位点 功能： DNA损伤时G1期停滞的关键性决定因素 在G2/M转折中起作用 参与细胞的终末分化和衰老 与DNA聚合酶δ的辅助因子PCNA结合，直接抑制DNA的合成。 表达调节： P53的转录激活调节 P53-非依赖的调节：P202、STAT信号通路、癌基因产物的负性调节（c-Myc、Set、Her2） 第34页/共65页 第35页/共65页 （二）P27 表达调节： 上调信号：phosphatase and tension homolog (PTEN ) Forkhead转录因子 (Afx、Fkhr、 Fkhr-L1） 下调信号：CpG岛过度甲基化 癌蛋白（c-Myc、Her2) （三）P57 在Beckwith-Wiedeman综合征（BWS)中丢失 受IGF-II的负调节 第36页/共65页 三、新的CKI-14-3-3σ 14-3-3家族的成员之一 与细胞分裂周期(cell division cycle，CDC)有关的基因CDC2 、CDK2和CDK4相互作用 抑制CDK活性 阻断细胞周期进展 第37页/共65页 Cell cycle主要直接依赖于一系列异二聚体蛋白激酶复合体的调节； 蛋白激酶复合体的活性依赖于各种cyclins的合成与降解； Cyclins的合成受各种生长因子影响； Cyclins的降解与泛素降解途径有关； 蛋白激酶复合体的活性还受CKI抑制。 小结 第38页/共65页 第三节 细胞周期的运行 第39页/共65页 细胞周期和其他的一些细胞生理过程就像多米诺骨牌 第40页/共65页 细胞在生长因子的刺激下，G1期cyclin D表达； 并与CDK4、CDK6结合而活化激酶； G1-CDK使下游的蛋白质如Rb磷酸化，磷酸化的Rb释放出转录因子E2F； 促进许多基因的转录，如编码cyclinE、A和CDK1\2的基因。 在G1-S期，cyclinE与CDK2结合，促进细胞通过G1/S限制点而进入S期。 一、细胞周期的启动（G0→G1） 第41页/共65页 生长因子促进细胞进入细胞周期 第42页/共65页 Cyclin D与CDK结合使Rb释放结合的转录因子E2F 第43页/共65页 二、DNA复制（ G1→S ） 在G1-S期，cyclinE与CDK2结合，促进细胞通过G1/S限制点而进入S期。 DNA的复制是由复制起始点（origins of replication）开始的; 复制起始点也就是自主复制序列，散布在染色体上; 在整个细胞周期中，复制起始点上结合有起始识别复合体（Origin recognition complex, ORC）; 第44页/共65页 CDC6是一个调节因子，在G1期CDC6含量瞬间提高; 细胞分裂周期(cell division cycle ，CDC) 基因CDC6结合在ORC上，在ATP供能下，促进6个亚单位构成的小染色体维持蛋白（mini-chromatin maintenance protein, MCM）复合体和其他一些蛋白结合到ORC上，形成前复制复合体（pre-RC）; -MCM实际上就是DNA解螺旋酶（helicase） 第45页/共65页 起始识别复合体 起始复制点 第46页/共65页 S-CDK触发pre-RC的启动，同时阻止了DNA再次进行复制; 因为S-CDK将CDC6磷酸化，使其脱离ORC; 磷