实验七培养基的制备与灭菌.pptVIP

实验目的 了解培养基的制备基本过程 掌握灭菌的基本方法和灭菌锅的使用 掌握实验器皿的基本包扎方法 第1页/共11页 实验原理 培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的营养基质。 一般来说，培养基包括有水份、碳源、氮源、无机盐类以及生长因子等营养成份。 此外还要有适宜的PH值，一定的渗透压（即盐浓度）以及氧化还原电位等。 第2页/共11页 原则 目的明确 营养协调 物化条件适合 节约 第3页/共11页 据组成成分可分为: 1.合成培养基 2.天然培养基 3.半合成培养基 从培养基的物理状态可分为 1.液体培养基 2.固体培养基 3.半固体培养基 据用途可分为： 1.基础培养基 2 .加富培养基 3.选择培养基 4.鉴别培养基 第4页/共11页 实验基本流程 原料称量、溶解 调节pH 分装 （过滤澄清 ） 灭菌 塞棉塞和包扎 设计，计算，准备 （摆斜面） 第5页/共11页 培养基成份的换算与称量 样品的溶解（淀粉等高分子物质应单独加热溶解，至澄清，再与其它组份混合） 如果培养基中存在能反应的物质应分别单独灭菌后，使用时按规定的量混合 不耐热的物质应单独过滤除菌 补齐剩余的水 粗调pH（对液体培养基直接调节到规定数值，固体培养基应待加热至琼脂完全溶解时再调一次pH） 注意事项 第6页/共11页 实验内容 牛肉膏蛋白胨固体培养基：3L 1组 牛肉膏蛋白胨固体培养基：1L 2组 90ml水/瓶，共6瓶 9ml水/支试管，30支 高氏一号固体培养基：1.2L 3组 葡萄糖蛋白胨水液体培养基：3ml/支试管60支 马丁氏固体培养基：1.2L 4组 蛋白胨水液体培养基： 3ml/支试管，60支 淀粉水解固体培养基：1.2L 5组 9ml水/支试管，30支 P111 第7页/共11页 培养基的分装、包扎 培养基的灭菌 第8页/共11页 灭菌的方法 干热灭菌：180度2－3小时（对器皿的灭菌） 火焰灼烧：对金属器皿的灭菌 间歇灭菌：对不耐热培养基 加压灭菌(湿热)：121度30分钟 （射线）紫外线杀菌：紫外线照射20分钟以上，对空气杀菌 第9页/共11页 作业 P.68 第10页/共11页 1000ml三角瓶 15ml试管 培养基配制的化学药品和琼脂 棉花 报纸 10ml移液管，100ml量筒，500ml量筒，1000ml量筒各2个 12个培养皿，1ml移液管5根 FeSO4.7H2O 溶液 10N NaOH 孟加拉红水溶液 ，重铬酸钾溶液 pH试纸 ，电炉，标签纸 ，玻棒，铝锅 ，天平 材料 第11页/共11页