pi3kakt信号途径介导的依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤后凋亡的影响-effects of edaravone postconditioning mediated by pi 3 kakt signal pathway on apoptosis of neonatal rat brain slices after hydrogen peroxide injury.docxVIP

下载本文档

7
0
约2.81万字
约 29页
2018-06-01 发布于上海
举报
版权申诉

pi3kakt信号途径介导的依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤后凋亡的影响-effects of edaravone postconditioning mediated by pi 3 kakt signal pathway on apoptosis of neonatal rat brain slices after hydrogen peroxide injury.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

pi3kakt信号途径介导的依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤后凋亡的影响-effects of edaravone postconditioning mediated by pi 3 kakt signal pathway on apoptosis of neonatal rat brain slices after hydrogen peroxide injury

PI3K/Akt信号途径介导的依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤后凋亡的影响专业：麻醉学研究生：黄道丰导师：王迪芬中文摘要目前，脑血管疾病与心脏病、恶性肿瘤构成人类的三大致死病因，在我国为第二大致死病因；其以高发病率、高致残率和高死亡率而严重危害着人们的身体健康。临床上脑动脉粥样硬化、颅脑损伤、颅内血管性疾病等患者都可能发生脑组织缺血缺氧，尽早恢复脑组织的血供是治疗脑缺血缺氧的关键，但随着血供的恢复，往往会发生脑组织的缺血再灌注(ischemic-reperfusionI/R)损伤，影响患者的预后和神经功能恢复。大量的研究已表明进行脑缺血预处理能减少缺血再灌注损伤，但脑缺血的发生具有不可预知性，预处理临床应用有很大的局限。缺血后处理(ischemicpostconditioning，IP)是指在组织缺血后、永久性再灌注前进行数次反复、短暂的再灌注/缺血处理或于再灌注前给予药物干预，调动机体内源性的保护机制以减轻组织再灌注损伤的处理措施，具有可控性，临床应用价值大。依达拉奉(Eda)作为一种自由基清除剂，其在脑缺血再灌注损伤的预处理中的保护作用已得到广泛的证实，而在组织水平上关于依达拉奉后处理对脑缺血再灌注损伤的作用及机制仍不清楚，值得我们进行研究。本课题通过乳鼠脑片过氧化氢(H202)损伤复制脑缺血再灌注损伤模型，观察依达拉奉后处理对乳鼠脑片缺血/再灌注损伤的保护作用。在此基础上，结合脑缺血/再灌注损伤的病理生理过程，进一步探讨依达拉奉后处理在乳鼠脑片缺血/再灌注损伤中的保护机制。从而为临床治疗脑缺血/再灌注损伤提供可靠的实验依据和理论基础。课题内容分为两部分：1.不同浓度依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤后凋亡的影响。2．磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号途径在依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤保护效应中的作用。第一部分不同浓度依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤后凋亡的影响目的：观察不同浓度依达拉奉(Eda)后处理对乳鼠脑片过氧化氢(H202)损伤的保护作用。方法：离体培养SD乳鼠大脑皮质脑片至第六天，将脑片随机分成对照组(Control组)、过氧化氢损伤组(H202组)、过氧化氢损伤+50μmol/L依达拉奉后处理组(Eda50组)、过氧化氢损伤+100μmol/L依达拉奉后处理组(Eda100组)、过氧化氢损伤+200μmol/L依达拉奉后处理组(Eda200组)，共五组，每组12例。Control组予不完全培养基作用30min后更换正常培养基继续培育24h，其余四组给予含有2mmol/LH2O2培养基作用30min后，H202组更换为正常培养基继续培养24h，Eda50、Eda100和Eda200组给予更换含对应浓度Eda的培养基继续培养24h，24h后，用HE染色观察脑片神经元形态学的改变及Nissl染色进行脑片存活神经元计数。结果：1.HE染色观察神经元形态学的改变:Control组神经元呈多边或梭形，胞膜完整，胞体饱满，细胞核清晰；H202组可见大量神经元细胞呈空泡状，胞核固缩，部分细胞卷曲、皱缩变形；Eda三组可见少量神经元细胞水肿、核固缩，细胞膜均较完整；2.Nissl染色计数存活神经元：与Control组相比，H202组神经元数量明显减少（P＜0.05）；与H202组相比，Eda三组的神经元数量均明显增多（P＜0.05），Eda组随Eda浓度的增加，神经元数量逐渐的增加（P＜0.05）.结论：依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤有剂量依赖性的保护作用。关键词：依达拉奉过氧化氢脑片后处理第二部分PI3K/Akt信号途径在依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤保护效应中的作用目的：探讨PI3K/Akt信号途径在依达拉奉后处理对乳鼠脑片过氧化氢损伤保护效应中的作用。方法：离体培养SD乳鼠大脑皮质脑片至第六天，将脑片随机分成对照组(Control组)、过氧化氢损伤组(H202组)、PI3K特异性抑制剂LY294002+过氧化氢损伤组(LY组)、过氧化氢损伤+200μmol/L依达拉奉后处理组(Eda200组)、PI3K特异性抑制剂LY294002+过氧化氢损伤+200μmol/L依达拉奉后处理组(Eda200+LY组)，共五组，每组12例。Control组予不完全培养基作用30min后更换正常培养基继续培育24h，LY组和Eda200+LY组给以含有10μmol/LPI3K特异性抑制剂LY294002的培养基作用30min后，除Control组外其余四组均给予含有2mmol/LH2O2培养基中作用30min，LY组和H202组更换为正常培养基继续培养24h，Eda200组和Eda200+LY组给予更换含有200μmol/LEda的培养基继续培养24h。于培养24h后，用HE染色观察乳鼠皮