血清蛋白glypican-3 survivin在肝细胞癌中的表达水平及其临床意义-expression of serum protein gly pican - 3 survivin in hepatocellular carcinoma and its clinical significance.docxVIP

学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。本论文属于保密，在年解密后适用本授权书。不保密。（请在相对应的方框内打“√” ）学位论文作者签名：日期：年月日 导师签名 ：日期：年月日中文摘要肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是全世界范围内常见的恶性肿瘤之 一，其发病率在恶性肿瘤中高居第六位，肿瘤相关死亡率居第三位。肝细胞癌 患者生存率低，复发转移率高，而大多数患者在就诊时已属中晚期，其全部 5 年生存率仅为 3-5%且仅有 30-40%的 HCC 患者在确诊时适宜手术，因此早期筛 查和诊断对于提高肝细胞癌患者的生存率和临床预后具有重要的意义。人生存 素 survivin 是凋亡抑制蛋白家族中分子最小的成员，近年来的研究发现其在肝 癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌等多种肿瘤组织中呈高水平表达，而正常组织中 几乎不表达，并且与化疗抵抗、肿瘤复发和肿瘤患者生存期有关。而关于 survivin 在肝细胞癌患者血清中的表达情况仅有 2 篇文献，且结论并不明确。磷脂酰肌 醇蛋白聚糖-3(Glypican3,GPC3)是硫酸乙酰肝素糖蛋白中磷脂酰肌醇聚糖家族中 的一员(GPC1-6)，通过 C 端与糖基磷脂酰基醇的结合而锚定于细胞外膜上，其 第 358 位的精氨酸与 359 位的丝氨酸发生解离，N 端进入血液中，称为可溶性 GPC3 蛋白。大量研究发现 GPC3 在调节细胞增殖、分化中起到重要作用，且在 胎肝和肝癌组织中特异性高表达，在正常成人组织中几乎无表达。对于 GPC3 在肝细胞癌血清中表达情况已有多篇文献报道，然而其结论并无一致性。因此， 本文将深入研究 survivin 与 GPC3 在肝细胞癌患者血清中的表达情况，探讨其对 肝细胞癌的诊断价值，并分析比较与肝癌病理分级、TNM 分期等临床病理特征 的关系，探讨其与预后的关系。目的: 1. 采用两种 ELISA 试剂盒对肝细胞癌血清中 survivin 表达水平进行检 测分析， 探讨检测血清 survivin 诊断肝细胞癌的可行性以及筛查一种有价值的 诊断试剂盒。2. 检测大样本肝细胞癌患者血清中 GPC3 表达水平，分析比较其 对肝细胞癌的诊断精确性，并与常规肝癌肿瘤标志物 AFP 比较诊断价值方法: 1.采用 RD 和 abnova 两种试剂盒以酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测 肝细胞癌、肝硬化、慢性乙型肝炎患者及正常成人血清中 survivin 蛋白浓度, 并 分析比较两种试剂盒检测结果的相关性与差异性。2. 采用 Human GPC3 RD Duoset 试剂盒检测 890 例血清样本(包括肝细胞癌 283 例，肝硬化 267 例，慢性 乙肝 162 例，正常对照 162 例和不典型增生 16 例)中 GPC3 蛋白含量，绘制 ROC 曲线，分析其对肝细胞癌的诊断精确性，并分析比较与肝癌病理分级、TNM 分 期等临床病理特征的关系，探讨其与预后的关系。I结果: 1. RD 试剂盒检测的 80 份血清样品中, survivin 阳性率为 8.75%(7/80)，肝细胞癌组阳性率为 5%(1/20)；对同样的血清样品, abnova 试剂盒 survivin 阳性 率为 22.5%(18/80)，其中肝细胞癌组阳性率为 25%(5/20)。且两种试剂盒检测结 果均显示 HCC 组与正常对照组 survivin 表达水平无明显差异；两种 ELISA 检测 试剂盒对同一份样品检测结果的相关系数 r 2 为 0.0064,，P = 0.481，abnova 试剂 盒结果阳性率高于 RD (P = 0.002)，表明 RD 和 abnova 两种试剂盒检测结果存在 差异。2. 血清 GPC3 在肝细胞癌、肝硬化、慢乙肝、正常对照和不典型增生中 的表达水平分别为 0 ng/ml (range=0-14.0ng/ml)，0 ng/ml (range=0-0ng/ml)，0ng/ml (range=0-12.5ng/ml)，0 ng/ml (range=0-1.7ng/ml)，和 0ng/ml(range=0-4.3ng/ml)