血清多肽组学在口腔鳞癌患者临床诊治中的应用分析-application analysis of serum polypeptide histochemistry in clinical diagnosis and treatment of oral squamous cell carcinoma.docxVIP

血清多肽组学 在口腔鳞癌 患者 临床 诊治 中的应用 研究 摘要 目的探讨不同临床分期的口腔鳞癌患者中血清多肽谱的差异，及其临床应用价值。 方法1. 采用基质辅助激光解析飞行时间质谱结合弱阳离子纳米磁珠检测 120 例健 康正常人、37 例早期口腔鳞癌患者、129 例晚期口腔鳞癌患者及其化疗前后的血 清中的多肽指纹图谱，应用 ClinProtToolsTM 2.1 软件对检测结果进行分析，建立 差异多肽的鉴别诊断模型，对模型中的差异多肽进行质谱分析和 IPI 数据库检索 确定相应蛋白质名称。统计软件为 Clinprot 及 Welch’s t 检验统计方法。2. 结合口腔鳞癌的临床各项指标，探讨其临床应用价值。3. 采用 ELISA 方法验证其中的 SCARA5 在健康正常人和口腔鳞癌患者血清 中的表达情况，采用 real-time PCR、免疫印迹和免疫组化验证 SCARA5 在口腔鳞 癌细胞和组织中的表达情况。结果初步建立健康正常人与口腔鳞癌早、晚期的鉴别诊断模型、识别率在遗传模 型达 79.2%的化疗疗效预测模型，以及灵敏度和特异度达 90%以上的口腔早期鳞 癌和癌前病变的鉴别模型。通过临床鳞癌组织样本和细胞系对质谱中鉴定的多肽 SCARA5 进行验证，免疫组化，免疫印迹和酶联免疫吸附测定试验实验显示 SCARA5 在肿瘤中为高表达。结论本研究采用血清多肽组学的方法，筛选和鉴定了部分口腔鳞癌不同发展阶段的差异多肽，为进一步开展血清多肽验证和差异蛋白质的机制研究奠定了结实的 基础。基质辅助激光解析飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）结合弱阳离子交换磁 珠检测方法可以作为预测 TPF 化疗后口腔鳞癌患者疗效的方法之一。鉴别模型还 可以辅助诊断不同类型但临床上具有相似特点的疾病。SCARA5 的高表达与口腔 癌的发生发展相关。关键词 口腔鳞癌；基质解析飞行时间质谱；纳米磁珠；血清多肽THE APPLICATION OF SERUM PEPTOMICS IN PATIENTS WITHORALSQUAMOUSCELLCARCINOMA Abstract ObjectiveTo investigate defferentially expressed serum peptides peaks from different clinical stage in OSCC patients and their clinical value.MethodsMALDI-TOF-MS with magnetic beads were used to analyze serum peptidomic profiles in 132 OSCC patients, including 37 patients with blood samples both before and after induction chemotherapy and 129 late stage OSCC patients. Model construction was performed using the software package of Clinprot tools 2.1 and provide the identification of peptides after searching the IPI human database. Welch’s t test is being used through caculation. To explore clinical value with oral squamous cell carcinoma clinical standard. With the application of ELISA,RT-PCR,IHC and western blot method to test the SCARA5 expression between the normal people and oral squamous cell carcinoma patients.ResultsThe classification model was made in patients with induction chemotherapy and the constructed model has a 79.2% recognition capacity. Peptides profiles are obtained in the diagnosis model of precancerous lesion group and normal health groups with 92.9% sensitivity a