抑制性免疫微环境中cd4ltgtcd69ltgtt细胞亚群的发现及其功能的初步鉴定-discovery and preliminary identification of cd 4 ltg tcd 69 lt gtt cell subsets in inhibitory immune microenvironment.docxVIP

CD分化鳞TGF-?转化生长因子翩。NKcell自然杀伤细胞MSCs髓系拥制细胞DC树突状细胞DiffDC分化样树究状细胞CIA胶原诱导的关节炎IL白细胞介素IFN叩7 干扰素VEGF血管内皮生长因子CCR7学脱氨酸w 半肮氨酸亚族受体 7NO一氧化氮PMA佛被醉酣MACS磁性激活细胞分离FACS流式细胞分析ELISA酶联免夜吸附试验本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人 巳经发表或撰写过的研究成果.与我一同工作的间在对本研究所做的 任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明 的法律责任.学位论文作者签名: 签字日期: 年月日学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有 权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文 被查阅和借阅本人授权第二军眩大学可以将学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手 段保存、汇编学位论文. (保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者接名:导师每名: 签字日期:年月第二军区大学硕 t学位论文中文摘要抑制性免疫微环境中 CD矿CD69+T 细胞亚群的发现及其功能的初步鉴定(中文摘要)一、研究背景:CD69 曾被称为活化诱导分子 AIM 、uu23、早期激活抗原EA1，ML旧， 其基因分别位于小鼠 6 号染色体及人 12 号染色体长臂的自然杀伤细胞 (NK) 基 因复合体，小鼠 CD69 分子的遗传学及生物学特征与人的同源物很相似. CD69 分子属于 C 型凝集素样超家族 NK 细胞膜受体，通过二硫键连接成同源二聚体， 该二聚体属于 11 型跨膜蛋白 e 成熟∞69 分子由 199 个氨基酸残基组成，胞浆区 有 38 个氨基酸残基，含丝/苏氨酸激酶磷酸化位点，此位点组成型磷酸化.在 CD69 分子胞膜外区的 C 末端有糖基识别位点，可能参与 CD69 分子识别病原体。 CD69 是炎症反应中白细胞的最早期活化标志，迅速并暂时性表达在活化淋巴细 胞表面，淋巴细胞活化后 1到 2 小时内即有表达， 18-24 小时可达到高峰。 CD69 广泛表达在除红细胞外的髓系细胞上(包括肥大细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞 等)，组成性表达在血小板、成熟胸腺细胞和前体淋巴细胞上，还表达在外周淋 巴器官的部分淋巴细胞上，但在外周血淋巴细胞及静息淋巴细胞上不表达，大多数时候 CD69 被看作一种淋巴细胞活化性标记，在细胞活化后表达上 调，然而目前的研究表明， CD69 在体内不单纯作为一种活化性或抑制性分子， 而是更倾向于作为辅助信号或者协同剌激信号参与免疫应答，譬如，肥大细胞通 过 FcεRI 介导肿瘤坏死因子 TNF 分泌，在此过程中， CD69 与抗 CD69 抗体结 合后能增强肥大细胞分泌炎症介质的作用，而单独 CD69 抗体不能有效刺激肥大 细胞分j;Q， TNF. PMA 活化人外周血 T 淋巴细胞表达 CD69 ，在活化型抗CD69 单克隆抗体存在的情况下能促进 T 细胞增殖，而单独 CD69 抗体或单独 PMA 作 用时均不能诱导 T 细胞显著增殖。可能是佛波醇酶 PMA 激活了蛋白激酶 C 途径， CD69 分子与配体结合后能增强该通路的效应。这些实验结果表明， CD69 分子 必须在某种剌激存在的前提下，对该刺激起到协同作用。CD69分子不仅能够辅助活化性信号，在抑制型信号的产生和功能中也起到 不可忽视的作用 a 早期研究认为 CD69是表达在不同自细胞表面的活化性标记 P第二JjI D巨大学确士学位论文中文摘要害因而称之为活化诱导分子 (AIM)，而最近的研究发现，CD69通过介导细胞分泌 TGF-? 1也能下调免疫反应，尽管活化早期即表达 CD69，假早期T细胞的活化和 增殖并不必需要有 CD69的参与，或者说CD69不起决定性作用，这一观点在 CD69-1-J、鼠模型中可以得到证实， CD69KO小鼠的T淋巴细胞发育正常，在各 种刺激剂作用下表现出同野生裂小鼠同样的增殖能力， T细胞和NK的杀伤功能也 未受到影响。然而 ω69却有可能在T细胞活化后的分化过程中表现出 3重要的作 用，∞69分子能够促进免疫调控因予了GF唰们的合成，通过该途径负向调控免 疫应答反应，该观点在体内及体外试验中均已得到证实。在 ω69缺陷小鼠体内诱导出的关节炎 CIA模型及NK敏感性肿瘤模型均表现出免疫反应增强，并且这 种增强与特异性免疫效应细胞成天然免疫相关细胞合成 TGF.? 1减少有关，体外 试验也已证实与活化型抗 ω69抗体结合后， CD69φ细胞 (T细胞、 NK细胞、巨 噬细胞)能分泌T