稀土及其配合物与微过氧化物酶相互作用机理的研讨.pdfVIP

摘要 摘要 近年来，由于可以促使农作物增产和品质的改善，稀土微肥在农业上的应用 越来越广泛。大量生物机理的研究表明，稀土离子在合理浓度下使用，可以改善 农作物抗病毒的能力，可以促进光合作用过程中光能的转化，还可以刺激细胞的 等酶的生物活性，但其化学机理尚不明白，这方面的研究也较少。主要原因是由 于这些酶具有高化学活性、结构复杂性、构象易变性等特点，使研究这些酶与稀 土离子相互作用比较困难。因此，本论文选取了与微过氧化物酶具有相似活性中 物，以Eu”为代表性的稀土离子，通过紫外．可见(UV-vis)吸收光谱、电化学方法和 电喷雾质谱等手段研究了MP．1l、MP．8和氯化血红素与Eu3+的相互作用，并且还 研究了稀土三元配合物与Eu3+的相互作用；为今后进一步研究稀土离子及其配合 物与酶的相互作用打下基础。得到的主要结果如下： 1．Eua+与MP-11相互作用的机理研究 (1)当MP-ll溶液中加入Eu”后，由于稀土离子易与氧键合，加上MP-11分 子中血红素卟啉环上的2个丙酸基团的羧基氧暴露程度大和带负电荷，E矿+优先与 MP．11分子中这2个羧基氧发生键合作用，形成配合物。由于这2个丙酸基团离 卟啉环较近，因此，Eu3+与这2个羧基氧的键合使血红素卟啉环的非平面性增加， 7t-ff‘跃迁所需要的能量减少，但7[-7[‘电子跃迁几率降低。由于肽链中氢键的形成， 肽链上的羰基基团被包埋在肽链的疏水基团中，所以，Zu3+基本上没有与MP．11 肽链中的羰基氧发生键合作用。 (2)电喷雾质谱研究发现，MP．11溶液qb 没有新的配合物产生，说明一分子Eu3+只与一分子MP．11相键合。电化学实验也证 氧基团发生了键合，因此在循环伏安曲线中，只观察到配合物的氧化还原峰，而 没有Eu3+的氧化还原峰。如果当Eu3+的浓度大于l时，除了配合物的氧化还原峰外， III 摘要 为l。 (3)当MP．11与Eu3+形成配合物后，配合物的氧化还原峰峰电位差，△Ep比 MP—ll的小，峰电流比MP一11的大，说明配合物的电化学反应可逆性比MP．1l好。 这是由于Eu”和MP．1l的相互作用时，Eup与MP．11分子中血红素卟啉环上的两 个羧基氧发生强的键合作用，使血红素卟啉环的非平面性增加，导致血红素卟啉 环中Fe的暴露程度增加而引起的。另外，配合物对氧还原的电化学活性要高于 MP一1l，表明Zu3+与MP．1l配位后，能增加MP．1l，的生物活性。 2．微过氧化物酶的肽链结构对其与Eup相互作用的影响 c)与Eu3+进行相互 用氯化血红素(Hemin)、MP．8、MP．1l和细胞色素C(Cyt 作用，来研究微过氧化物酶的肽链长度对其与稀土离子相互作用的影响，为进一 步研究酶与稀土离子相互作用的机理打下基础。 和Cyt 吸光度的下降和峰位的红移都是最大的，而cytc的改变最小。由于Hemin的卟啉 环没有与肽链相连，其带负电荷的丙酸基团的两个羧基氧完全裸露，最易与Eu3+ c分子中血红素卟啉环所连的肽链最多，也最复杂，几乎将卟啉环上 键合。而Cyt 的丙酸基团完全包埋，羧基氧裸露程度最低，最不易与Eu3+键合。MP-8和MP一11 由于肽链长度的不同而引起它们聚集方式的不同。MP．11以头尾相连的无规方式 聚集，各MP．11分子的血红素平面不平行，结构比较松散，所以Eu3+与其作用后， 引起的血红素非平面性增加的程度会较大。而MP．8分子是以血红素平面平行的密 堆积的方式聚集，所以MP．8血红素原来的非平面性要低于MP．11，Eu3+与其作用 后，血红素非平面性增加也比较困难，MP．8和MP．1l原来的Soret带峰位分别为 小依次为HeminMP-8MP．1c。 lCyt 摘要 尔比为1的配合物。但是，虽然Eu3+与Hemin的键合最强，可在它们的配合物的 循环伏安曲线中，基本上观察不到氧化还原峰，表明EB3+阻碍了Heroin的电化学 积方式较MP·8松散，因此，Eua+与MP．11作用引起的血红素非平面性增加的程度 要大于MP．8，所以Eu3+对MP．11的电化学反应的促进作用要大