荧光型蛋白质分子印迹资料的制备及其应用研究.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 蛋白质组学是当今最为重要的研究领域之一，与人类健康和社会发展具有 十分密切的关系。对蛋白质的深入研究不仅能为揭示生命活动规律提供物质基 础，也能为众多疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径，对于促进生 命科学的发展具有重大意义。然而在实际生命样品的分析中，由于不同种类的 蛋白质总是与基体组分共存，如人和动物的血浆中的基体组分十分复杂，因此， 从复杂基体样品系统中选择性地分离和识别特定目标蛋白质己成为蛋白质研究 的瓶颈问题之一。分子印迹技术(molecular imprinted 目标分析物具有特异性的识别能力，成为当前解决这～问题的理想方法之一。 dots，QDs)是一种由II～Ⅵ族或Ⅲ～V族元素组成的、能 量子点(quantum 够接受激发光产生荧光的半导体纳米晶粒。本课题将量子点和蛋白质分子印迹 联合，结合分子印迹技术的高选择性与量子点荧光检测技术的高灵敏性，开展 了几类荧光型的蛋白质分子印迹材料的制备方法及应用方面的研究。本论文内 容包括： 1．综述了分子印迹技术的原理，研究进展及应用；量子点的基本知识；量 子点表面修饰；分子印迹．量子点纳米材料的发展概况；此外，还简要介绍了本 论文的立题思想及创新点。 2．在第二章中，将量子点表面修饰与印迹过程相结合，对荧光型蛋白质印 迹材料进行了初步探索。首先考察了不同蛋白质与量子点之间的相互作用，通 过比较选择了合适的模板分子。量子点表面通过非共价方式结合上模板蛋白， 然后选择合适的功能单体和交联试剂，以表面聚合的方式进行印迹。选择适宜 的洗脱溶液洗去模板分子，从而得到具有特异性识别能力和荧光响应的蛋白质 分子印迹．量子点纳米复合粒子。通过荧光强度的变化考察了纳米复合粒子对模 板蛋白的识别行为。 3．在第三章中，以变性的牛血清蛋白(dBSA)修饰在量子点表面，采用溶 胶凝胶的方法制备分子印迹．量子点复合材料。选用dBSA修饰量子点不仅可以 增加量子点的稳定性和荧光特性，而且可以作为功能单体对模板分子起辅助识 别作用。本工作的特色之处在于：1)dBSA修饰量子点不仅可以增加量子点的 中文摘要 稳定性和荧光特性，而且对模板分子起辅助识别作用；2)不仅用荧光表征了印 迹材料的识别效果和印迹效果，而且用吸附实验进一步证明了材料的选择性识 别性能；3)对实际样品进行了分析，取得了良好的效果。 4．在前两章研究的基础上，探索了温敏特性的荧光型蛋白质印迹材料的制 备方法。将温敏特性的蛋白质印迹聚合物(MIP)修饰到包硅的量子点表面，制 备温敏特性的荧光型蛋白质印迹材料。选用硅烷化试剂修饰量子点不但增强其 稳定性，而且可以使该纳米粒子具有良好的生物相容性，也便于对其表面作进 一步的修饰。通过NIPAAm和MBA的聚合，可以在纳米粒子的表面键合分子 印迹聚合物。实验结果表明该方法制备的印迹材料具有良好的识别能力，可以 通过温度的改变调节印迹材料的识别性能。 5．探索了糖蛋白识别的新方法。选用包硅的量子点为载体，氨基苯硼酸作 为识别单元，探索了荧光型介孔材料的制备方法并用于糖蛋白的选择性识别。 通过优化硅烷化试剂、CTAB、氨基苯硼酸的配比，确定荧光材料制备条件。然 后分别以氮气吸附、透射电镜、XPS等手段表征了介孔材料的性质，通过紫外 和荧光光谱法分别表征了材料的选择性识别能力，实验结果表明该材料可用于 一类糖蛋白的识别。最后，探索了在此种材料表面修饰分子印迹膜，并用于目 标糖蛋白的选择性识别。 关键词：蛋白质，分子印迹，量子点，荧光，纳米材料 II Abstract Pmteomicsisoneofthemost research has important a close fields，whichverv with humanhealthand rela