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分子印迹技术在中药研究中应用 　　（甘肃中医学院，甘肃 兰州 730000）?? 　　 　　摘 要：分子印迹技术（MIT）是一种使所得聚合物的作用点，对目标分子具有预定识别、选择性的聚合物制备技术。就分子印迹技术的原理、制备及其在中药活性成分的分离、有效成分的固相萃取、对手性异构体及结构类似物的分离等方面进行综述，并展望了分子印迹技术在中药学领域的发展趋势。? 　　关键词：分子印迹技术；分子印迹聚合物；中药；提取分离? 　　中图分类号：R284文献标识码：A文章编号：1673-2197（2009）03-0138-03?? 　　 　　分子印迹技术（molecular imprinting technology，MIT）是将功能单体，在模板分子的存在下交联聚合，然后洗脱除去模板分子，制得的聚合物在立体空穴和功能基排布上与目标分子具有互补的结构。由于其具有高选择性和高强度的优点，与天然抗体相比制备简单，且模板分子可重复使用，现已广??用于手性固定相、仿生传感器、固相萃取、模拟酶催化及药物控释等领域中。? 　　 　　1 分子印迹聚合物（molecule imprinting polymer，MIP）的制备? 　　 　　1.1 本体聚合法? 　　把印迹分子、功能单体、交联剂和引发剂按一定比例溶于惰性溶剂，密封在真空环境中，经聚合制得棒状印迹聚合物。此法制备工艺简单，但处理过程费时费力，MIP利用率低，所得粒子的不规则性降低了其分离能力。? 　　1.2 原位聚合? 　　在色谱柱内直接聚合制得连续型棒状MIP。此法较简单，且制得的MIP具有连续性、均一性的特点，从而得到较好的分离效果。? 　　1.3 悬浮聚合? 　　采用全氟化碳液体作为悬浮介质，代替了传统的有机溶剂――水悬浮介质，从而根除了非共价印迹中存在的不稳定的预组织合成物。? 　　1.4 溶胀聚合? 　　溶胀聚合又称为多步溶胀悬浮聚合或种子溶胀悬浮聚合。采用乳液聚合法合成粒径较小的微球作为种子，再用一定的乳液进行多次溶胀种子，通过还原剂的加入经光引发或热引发聚合物制得符合要求的MIPs微球。? 　　1.5 表面聚合? 　　表面聚合是把印迹分子和功能单体在溶剂中形成的复合物，与表面活化过的硅胶/聚三羟甲基丙烷三丙烯酸酯粒子/玻璃等介质反应接枝聚合，从而制得MIPs的一种方法。这一方法解决了本体聚合中印迹分子包埋过深或过紧而难洗脱的问题。? 　　 　　2 在中药提取分离中的应用? 　　 　　中药是我国具有国际比较优势的产业之一，但其所含成分非常复杂，为了提高中药的疗效，减低毒副作用，提高中药制剂的内在质量，选用合理的提取分离技术是非常重要的。分子印迹技术与色谱分离技术相比，具有分子识别性强、固定相制备简便快速、操作简单、性质稳定（耐酸碱、耐高温、高压等）、溶剂消耗量小、模板和MIPs可以回收再利用等优点，在中药有效成分的提取分离中有很好的应用前景。? 　　2.1 在固相萃取中的应用? 　　分子印迹聚合物用于固相萃取的主要作用是分离、提纯和浓缩样品，能够克服生物或环境样品体系复杂、预处理手续繁杂等不利因素，对于痕量分析有重要作用和意义，是一种样品预处理技术。陈移姣等[1]以咖啡因为模板，采用水溶液悬浮聚合法制备了用于色谱分离（作HPLC的固定相）的微米级分子印迹填充膜，通过改变HPLC的流动相缓冲溶液的pH值，研究了咖啡因在MIPs柱上的容量因子（k）、分离因子（α）和印迹因子（β），说明该MIM在水溶液中对茶叶中的咖啡因进行了分离富集。颜流水等[2]制备的槲皮素MIP，将其作为吸附剂填充成固相萃取柱，结合毛细管电泳仪，对比槲皮素及其结构相似物芦丁的混合物电泳图，结果表明，芦丁分子由于羟基与葡萄糖和鼠李糖相连，空间体积比槲皮素大，较难进入由模板分子槲皮素形成的分子印迹孔穴，而槲皮素是通过特异性识别作用吸附在印迹孔穴内。向海艳等[3]以反式白藜芦醇为模板分子，采用溶液聚合方法，合成白藜芦醇的MIP，研究表明该印迹聚合物中形成了2类不同的结合位点。虎杖提取物经固相萃取，得到主要含白藜芦醇及少量结构与其相似的白藜芦醇甙组分。张春静等[4]用奎宁作为模板分子，以醋酸纤维膜为支撑体，制备对奎宁及其类似物有特异择性的分子印迹复合膜，膜结合性研究表明该膜对模板分子奎宁具有独特的结合能力，结合量可达到20.6μmol/g，分离因子为5.6。膜透过实验表明非模板分子辛可宁透过印迹膜速率较大，这将有利于奎宁和辛可宁的分离。? 　　2.2 在对手性化合物分离方面的应用? 　　由于分子印迹聚合物具有分子水平上的专一性识别，同时具有MIPs良好的操作稳定性及识别性质，不受酸、碱、热、有机溶剂等各种环境因素影响的特点，决定了分子印迹聚合物在手性分离方面的广泛应