常用动物实验技术(全).ppt

常用动物实验技术与方法 常用动物实验技术与方法 动物实验前的准备 实验动物编号的标记方法 实验动物被毛的去除方法 实验动物的抓取与保定 常用实验动物的麻醉 实验动物的血液采集 实验动物体液采集 实验动物的给药方法 实验动物的处死与取材 猴采血法动脉采血 实验动物的血液采集 动脉采血 股动脉可触及。取血量多时常被优先选用，手法与狗股动脉采血相似。此外，肱动脉与桡动脉也可用。 小鼠采血法 实验动物的血液采集 心脏穿刺采血 麻醉动物，将动物仰放，局部酒精消毒。用塑料注射器，从动物的左侧胸部，肋沿下，心尖部向右侧15-30度角刺入心脏，给小负压，小心操作。 小鼠采血法最大安全采血量 实验动物的血液采集 最大安全采血量： 小鼠循环血量占体重的6%，或 50-70ml/kg。采血占全血量的10% 不会对机体造成严重的不良影响。3-4周后可以重新采集一次。 如果需要很短时间反复采血，比如每天一次，每次的采血量不应超过全血的1%。30g×6%=血量1.8ml 1.8ml×10%=0.18ml(最大安全采血量) 实验动物体液的采集 实验动物体液的采集 ◎ 尿液的采集 ◎ 淋巴液的采集 ◎ 脑脊液的采集 ◎ 阴道液的采集 ◎ 胸水的采集 ◎ 精液的采集 ◎ 腹水的采集 ◎ 前列腺液的采集 ◎ 唾液的采集 ◎ 乳汁的采集 ◎ 胃液的采集 ◎ 骨髓的采集 ◎ 胰液和胆汁的采集 尿液的采集用代谢笼采集尿液 实验动物体液的采集 用代谢笼采集尿液 ???? 代谢笼用于收集实验动物自然排出的尿液，是一种特别设计的为采集实验动物各种排泄物的密封式饲养笼，有的代谢笼除可收集尿液外，又可收集粪便和动物呼出的CO2。一般简单的代谢笼主要用来收集尿液。放在代谢笼内饲养的实验动物，可通过其特殊装置收集尿液。 代 谢 笼用代谢笼采集尿液 实验动物体液的采集 尿液的采集导尿法收集尿液 实验动物体液的采集 导尿法收集尿液 施行导尿术，较适宜于犬、猴等大动物。一般不需要麻醉，导尿时将实验动物仰卧固定，用甘油润滑导尿管。对雄性动物，操作员用一只手握住阴茎，另一只手将阴茎包皮向上，暴露龟头，使尿道口张开，将导尿管缓慢插入，导尿管推进到尿道球部时有抵抗感，此时注意动作轻柔，继续向膀胱推进导尿管，即有尿液流出。雌性动物尿道外口在阴道前庭，导尿时于阴道前庭腹侧将导尿管插入阴道外口，其后操作同雄性动物导尿术。 用导尿法导尿可采集到没有污染的尿液。如果严格执行无菌操作，可收集到无菌尿液。 尿液的采集输尿管插管采集尿液 实验动物体液的采集 输尿管插管采集尿液 一般用于要求精确计量单位时间内实验动物排尿量的实验。剖腹后，将膀胱牵拉至腹腔外，暴露膀胱底两侧的输尿管。在两侧输尿管近膀胱处用线分别结扎，于输尿管结扎处上方剪一小口，向肾脏方向分别插入充满生理盐水的插管,用线结扎固定插管,即可见尿液从插管滴出，可以收集。采尿过程中要用38℃热生理盐水纱布遮盖切口及膀胱。 尿液的采集压迫膀胱采集尿液 实验动物体液的采集 压迫膀胱采集尿液 实验人员用手在实验动物下腹部加压，手法既轻柔又有力。当增加的压力使实验动物膀胱括约肌松弛时，尿液会自动流出，即行收集。 尿液的采集穿刺膀胱采集尿液 实验动物体液的采集 穿刺膀胱采集尿液 实验动物麻醉固定后，剪去下腹部耻骨联合之上，腹正中线两侧的被毛，消毒后用注射针头接注射器穿刺。取直角进针，针头穿过皮肤后稍微改变角度，以避免穿刺后漏尿，然后刺向膀胱方向，边缓慢进针边回抽直到抽到尿液为止。 尿液的采集剖腹采集尿液 实验动物体液的采集 剖腹采集尿液 按上述穿刺膀胱采集尿液法做术前准备,其皮肤准备范围应更大。剖腹暴露膀胱，直视下穿刺膀胱抽取尿液。也可于穿刺前用无齿镊夹住部分膀胱壁，从镊子下方的膀胱壁进针抽尿。 尿液的采集提鼠采集尿液 实验动物体液的采集 提鼠采集尿液 鼠类被人抓住尾巴提起即出现排尿反射,以小鼠的这种反射最明显。可以利用这一反射收集尿液。当鼠类被提起尾巴排尿后，尿滴挂在尿道外口附近的被毛上，不会马上流走，操作人员应迅速用吸管或玻璃管接住尿滴。 脑脊液的采集 实验动物体液的采集 脑脊液可能通过脊髓腔穿刺法采集，小动物也可通过枕骨大孔直接采集。 狗、免脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法：穿刺部位在两髂连线中点稍下方第七腰椎间隙。动物轻度麻醉后，侧卧位固定，使头部及尾部向腰部尽量屈曲，剪去第七腰椎周围的被毛。消毒后操作者在动物背部用左手拇、食指固定穿刺部位的皮肤，右手持腰穿刺针直刺入，当有落空感及动物 的后肢跳动时，表明针已达椎管内