益气养血颗粒质量标准研究.docVIP

益气养血颗粒质量标准研究 　　摘 要：目的:建立益气养血颗粒的质量控制方法。方法：用薄层色谱法对该药的黄芪、陈皮、淫羊藿进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定陈皮。结果:薄层色谱鉴别斑点清晰，阴性对照无干扰，橙皮苷在20.08～602.4ng范围内线性关系良好（r=0.9999）,平均回收率为99.04%，RSD=1.76%(n=6)。结论：该法操作简便，方法稳定，专属性强，可作为该制剂的质量控制方法。 　　关键词：益气养血颗粒；薄层色谱法；HPLC；橙皮苷 　　中图分类号：R284.1文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）09-0032-03 　　 　　益气养血颗粒是由人参、黄芪、陈皮、淫羊藿等中草药组成，具有益气养血的功效，用于气血不足所致的气短心悸，面色不华，体虚乏力。为控制该药品的质量，本研究对该药中的黄芪、陈皮、淫羊藿3种药材进行了薄层鉴别，并采用 HPLC法测定陈皮中橙皮苷的含量。 　　 　　1 仪器与试药 　　 　　1.1 仪器 　　安捷伦Agilent-1200高效液相色谱仪,ChemStation 色谱工作站，日本AND GR-202电子分析天平。 　　1.2 试药 　　益气养血颗粒及各被检药材的阴性制剂由广西嘉进药业有限公司提供；黄芪甲苷、淫羊藿苷、橙皮苷对照品购于中国药品生物制品检定所；硅胶G、GF254为化学纯(青岛海洋化工厂)；其它化学试剂均为分析纯。 　　 　　2 方法与结果 　　 　　2.1 薄层鉴别 　　2.1.1 黄芪鉴别 　　取本品10g，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用氨试液振摇洗涤3次，每次20mL，取正丁醇液蒸干，残渣加稀乙醇1mL使溶解，加在中性氧化铝柱（100~120目，2g，内径1.5cm）上，用40%乙醇50mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水1mL使溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，柱高12cm）上，依次用水20mL、40%乙醇30mL洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇50mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取缺黄芪的阴性样品同法制成阴性对照溶液再取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述3种对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（13∶5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶???，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品则不显示。见图 1。 　　 　　2.1.2 陈皮鉴别 　　取本品细粉10g，加水20mL使溶解，置分液漏斗中，加环己烷振摇洗涤3次，每次20mL，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。另取缺陈皮的阴性样品同法制成阴性对照溶液，另取橙皮苷对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酯乙酯-甲醇-水-吡啶（100∶17∶13∶5）为展开剂，展至约3cm，取出，晾干，再以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（20∶10∶1∶1）的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性样品则不显示。见图 2。 　　2.1.3 淫羊藿鉴别 　　称取本品细粉10g，加水30mL使熔解，水液用乙醚振摇提取3次，每次30mL，弃去乙醚液，水液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次30mL，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液。另取缺淫羊藿的阴性样品同法制成阴性对照溶液，另取淫羊藿苷对照品加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-丁酮-水（10∶1∶1∶1）液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性样品则不显示。见图 3。 　　 　　2.2 含量测定 　　2.2.1 色谱条件分析 　　Agilent SB-C18柱(250 mm×4．6 mm，5μm)；乙腈－0.1%磷酸 (20：80) 为流动相；流速1.0mL/min；检测波长283nm。 　　2.2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含20μg的溶液，即得。 　　2.2.3 供试品溶液的制备 　　取本品粉末约1g置锥形瓶中，精密称定，精密加甲醇25mL，称定重量，回流1