β-肾上腺素能受体基因导向美托洛尔降压疗效差异的相关因素分析-内科学(心血管)专业论文.docxVIP

硕士学位论文 中文摘要摘要目的研究p1．肾上腺素能受体(131一AR)基因导向美托洛尔降 压疗效差异的相关个体获得性因素；探讨DNA甲基化修饰对p1．AR基因表达调控的影响，了解基因导向美托洛尔降压疗效差异的表观遗传学分子机制，丰富和完善高血压病个体化治疗的基础和临床研究资 料。方法应用聚合酶链式反应．限制性片断长度多态性 (PCR．RFLP)和聚合酶链式反应(PCR)方法检测CYP2D6木10位点 和p1．AR389位点的基因多态性。筛选CYP2D6*10位基因型为水1010 的原发性高血压患者107例，按照D1．AR389位基因型分为Arg／Arg组和 Gly／Arg+Gly／Gly组；收集性别、年龄、身高、体重、血糖、血脂、 吸烟史等相关资料；并给予美托洛尔lOOmg／d，一天两次口服降压治 疗，随访8周，观察比较两组血压、心率及不良反应等指标。从前一部分研究中，进一步筛选CYP2D6木10位基因型为木1010 且131．AR389位基因型为Arg／Arg的63侈IJ原发性高血压患者作为本研究 的入选病例，利用已经收集的相关资料和最终的美托洛尔降压疗效判断结果，行单因素和多因素综合分析患者的年龄、基线血压、体质指数(BM)、高脂血症、吸烟等相关个体获得性因素和美托洛尔降压疗效差异的关系。 此外，对H9c2大鼠心肌细胞常规培养后随机分为5．氮脱氧胞(5-aza．dC)实验组和DMSO对照组。实验组细胞按照5．aza．dC干预 浓度的不同分别设计0．5“mol／L、2．09mol／L、5．0pmol／L、10．Ol上mol／L 四个工作浓度组，实验组及对照组细胞均干预72h。比较H9c21二肌细胞数量及形态的变化，并应用AO／EB染色法观察和比较细胞凋亡情 况；亚硫酸钠测序、甲基化特异性PCR(MSP)检测H9c2心肌细胞 131．AR基因启动子区甲基化修饰状态；荧光定量RT．PCR分析该基因 mRNA表达的差异。结果1．研究131．AR基因导向美托洛尔降压疗效的差异：107例硕士学位论文 中文摘要CYP2D6*1010的原发性高血压患者，按,照131．AR389位点基因多态性 分为Arg／Arg组63侈JJ、Gly／Arg+Gly／Gly组44例，两组美托洛尔降压有 效率分别为65．5％、40．9％，差异有统计学意义(Po．05)；进一步分析发现，AledArg组中仍有23侈1J患者降压治疗无效，其无效率高达35．5％。，2．分析131．AR基因导向美托洛尔降压疗效差异的相关获得性因 素：单因素分析结果提示，基线收缩压和BMI显著影响美托洛尔降 压疗效(P0．05)。而年龄、基线舒张压、高脂血症、吸烟和美托洛 尔降压有效率之间未见显著关系(P0．05)。多因素综合分析结果提 示，基线收缩压是影响美托洛尔降压疗效的重要原因。3．探讨131．AR基因导向美托洛尔降压疗效差异的表观遗传学分子 机制：H9c2大鼠心肌细胞131．AR基因启动子区存在甲基化修饰。 5．0／．tmol／L 5-aza—dC对心肌细胞干预后，131．AR基因启动子区甲基化水 平下调，该基因mRNA表达水平随之明显升高，和对照组比较，差异 有统计学意义(PO．05)。结论1．131．AR Gly389Arg基因多态性影响美托洛尔降压疗效， aredArg基因型原发性高血压患者降压疗效显著优于Gly／Arg和 Gly／Gly基因型患者。然而，即使是Arg／Arg的敏感型高血压患者中 美托洛尔降压疗效仍然存在显著的个体差异，基线收缩压和BMI是 131．AR基因导向美托洛降压疗效差异的重要原因，较高的基线收缩压和正常BMI的患者预示着更好的药物疗效。2．131．AR基因启动子区存在甲基化修饰，该区域DNA甲基化水 平下调促进p1．AR基因mRNA的表达。因此推测，DNA甲基化可能 通过调控受体基因表达，成为131．AR基因导向美托洛尔降压疗效差 异的重要表观遗传学分子机制。关键词 高血压；美托洛尔；13 1．肾上腺素能受体；基因：DNA甲 基化ⅡABSTRACTObj ections To study the related individual acquired factors，whichwould result in the different antihypertension efficacy of metoprolol inp 1．adrenergic receptor(p 1．㈣gene—directed therapy．In addition，toinvestigate the role of DNA methylation in the control of expression of p 1．AR gene，this may be the