第六章 诊 断 酶 学PPT.ppt

第六章  诊 断 酶 学;教学目标; 第一节 血 清 酶 ;一、血清酶的来源; 名称;三、血清酶变化的病理机制;（二）释放增加（大多数血清酶增高的主要机制）;（三）排出异常;四、血清酶的生理差异;第 二 节 酶活性浓度的测定技术;酶活性浓度的测定技术;一、酶活性浓度的概念; 3. 酶活性浓度; 实际上是通过检测酶活性浓度间接反映酶的量，因为直接检测酶的质量浓度要求的实验条件及技术条件非常高，价格昂贵，不适用于临床检测，因此测定酶活性浓度是临床酶学分析最为常见的方法，具有迅速、灵敏、成本低等特点。;零级;单试剂测定体系酶促反应进程曲线;结论： 为了计算酶活性浓度，必须根据线性反应期（零级反应期）的反应速率才能准确计算出酶活性浓度否则将导致误差。 酶活性浓度测定就是要使酶促反应的初速度达到Vmax，即在过量底物存在下的零级反应期的V，此时V与[E]之间有线性关系。;二、酶活性浓度测定方法;（二）按反应时间分类; 定时法，早期测定酶活性浓度的方法，大多是使酶作用一段时间，然后加入强酸、强碱、蛋白沉淀剂等终止酶促反应，测定这段时间内底物的减少量或产物的生成量，计算酶促反应的平均速度。;2、连续监测法（动力学法、速率法）;三、连续监测法测定酶活性浓度;（1） 目前以分光光度法最为广泛， 利用340nm处吸光度的变化测定各种脱氢酶。;（1）在原反应体系中加入一些试剂，其只和酶反应物迅速作用，产生可被检出的物质，但该试剂不和酶反应，也不影响酶的活性。;（二）酶偶联反应;1. 酶偶联反应时相;;2. 酶偶联反应注意事项;（三）干扰因素;四、工具酶;（三）工具酶参与的指示反应;例：葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖;2. NAD(P)+或NAD(P)H偶联的脱氢酶及其指示反应;五、血清酶活性浓度测定条件的优化;标本的采集、运输与保存;六、酶活性浓度单位;（二）酶活性浓度单位;（三）酶活性浓度计算; 自动生物化学分析仪测定同一酶，条件固定时，从理论上讲V，v和L均为固定值， ε为常数，则可将公式简写为： ;第 三 节 酶的免疫化学测定;一、报告方式;三、缺点;第 四 节 同工酶及其亚型测定;一、概念;二、分析方法;二、分析方法;显色染料;（二）色谱法 ;（三）免疫分析法;（四）动力学分析法;三、同工酶检测意义;第 五节 临床常用血清酶分析 ;一、转氨酶（ Aminotransferases ）及其同工酶;2.组织分布;3.标本; AST主要用于肝脏疾病的诊断;二、 γ-谷氨酰转移酶及其同工酶; 2. 组织分布;4. 临床意义;三、 肌酸激酶及其同工酶和亚型;2. 组织分布; 4. 临床意义;四、乳酸脱氢酶及其同工酶和亚型; 2. 组织分布;3. 标本;4. 临床意义;五、碱性磷酸酶及其同工酶; 3. 标本;六、酸性磷酸酶及其同工酶; 临床意义;七、淀粉酶及其同工酶; 3. 标本;八、脂肪酶;九、胆碱酯酶;临床各系统疾病的酶学诊断;三、胰腺疾病; 小 结 1.掌握血清酶的来源与去路及其变化的病理 机制 2.掌握临床常用血清酶、同工酶及其亚型 3.熟悉酶活性测定技术、酶的免疫化学测定 同工酶及其亚型测定 4.熟悉酶活性浓度定义及酶促反应进程。 5.了解酶的基本概念，底物浓度对酶促反应速度的 影响。