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04.体外分析技术PPT
人附睾上皮分泌蛋白4(HE4) 癌抗原CA125属于一种与上皮性卵巢癌相关的高分子糖蛋白,表达于胚胎体腔上皮组织,存在于上皮性卵巢癌组织和病人的血清中。 CA125主要用于辅助诊断恶性浆液性卵巢癌,上皮性卵巢癌,同时也是卵巢癌术后、化疗后疗效观察的指标。应持续动态的观察。 人附睾上皮分泌蛋白4(HE4) 鳞状细胞癌抗原(SCCA)是一组属于丝氨酸/半胱氨酸蛋白酶抑制物家族的糖蛋白,分子量约为45KDa。SCCA由两组高度同源而生物学截然不同的基因产物组成-SCCA1和SCCA2。 鳞状细胞癌抗原(SCCA) 人附睾上皮分泌蛋白4(HE4) (2)健康人群中的鳞状细胞恶性肿瘤的早期筛查。 (1)子宫颈癌、肺癌、食道癌、头颈部肿瘤和外阴部肿瘤的诊断、手术或放化疗前后的疗效观察及复发预测。 人附睾上皮分泌蛋白4(HE4) CYFRA21-1是由抗细胞角蛋白19片断的单克隆抗体BM9-21及Ks19-1所证实的抗原,是检测非小细胞肺癌的首选肿瘤标志物。此外,CYFRA21-1的浓度升高也可见于乳腺癌、食管癌和头颈癌等。 前列腺特异性抗原(PSA) PSA是前列腺的特异性标记物 属于器官特异性抗原,不具备肿瘤特异性 PSA属于酶类肿瘤标记物,具有糜蛋白酶 样和胰蛋白酶的活性 PSA在正常男性含量小于4?g/L 游离PSA在正常男性含量小于1?g/L 前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎和前列腺损伤都会导致血清PSA升高 血清 PSA在男性其他正常组织中和患其他癌肿时血清PSA都不会升高。 肿瘤标记物的临床意义 一般人群筛选 -有限 在有症状的人群中作辅助诊断 -可以 肿瘤分期 -有限 预测预后 -可以 监测治疗效果 -可以 追踪疾病的复发 -可以 (二)性激素相关指标 激素分类 蛋白激素 促性腺激素释放激素(GnRH) 促黄体激素 (LH) 促卵泡激素 (FSH) 人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 抑制素 (Inhibin) 泌乳素 (Prolactin) 类固醇激素 雌性激素 雌酮 (E1) 雌二醇 (E2) 雌三醇 (E3) 孕酮 雄性激素 睾酮 双氢睾酮 (DHT) 雄烯二酮 雄酮 脱氢表雄酮 (DHEA) 硫酸脱氢表雄酮 (DHEA-S) 生殖内分泌激素的检测 内分泌失调疾病的诊断和管理 儿童时期 青春期 成年期 绝经期和更年期 不育和辅助生殖 胎儿健康 4、化学发光免疫分析技术 免疫化学发光分析技术 (chemiluminescence immunoassay,CLIA) 化学发光酶免疫分析技术 (chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA) 电化学发光免疫分析技术 (electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA) 4、化学发光免疫分析技术 ①免疫化学发光分析技术 用吖啶酯直接标记抗体(抗原),与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体复合物,这时只需加入氧化剂和pH纠正液成为碱性环境,吖啶酯即可在不需要催化剂的情况下分解、发光 。 由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能,这部分光的积分与待测抗原的量成正比,可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。 4、化学发光免疫分析技术 发光 Y Y Y 磁微粒 被测抗原 + 抗体 + 带丫啶酯标记物抗体 Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y 冲洗后 (1) 加入H2O2 (pH10) (2) 加入碱 (pH10) 4、化学发光免疫分析技术 ②化学发光酶免疫分析技术 用参与催化某一化学发光反应的酶来标记抗原或抗体,在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,经洗涤后,加入底物(发光剂),酶催化和分解底物发光,由光量子阅读系统接收,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们传送至计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。 标记物 发光剂 辣根过氧化物酶(HRP) 鲁米诺 碱性磷酸酶 AMPPD 辣根过氧化物酶标记化学发光免疫分析示意图 碱性磷酸酶标记化学发光免疫分析示意图 4、化学发光免疫分析技术 ③电化学发光免疫分析技术 以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体(抗原),以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应,它包括电化学和化学发光两个过程。 电
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